MAP65-3是植物胞质分裂的重要调节因子.为探究水稻OsMAP65-3基因的功能,本研究采用CRISPR/Cas9技术对水稻中OsMAP65-3基因(OsMAP65-3.1和OsMAP65-3.2)进行编辑.针对每个基因各设计了2个不同的靶位点,并将OsMAP65-3.1与OsMAP65-3.2的靶位点放在同一个载体上,构建了CSMAP65-3A和CSMAP65-3B 2个双基因编辑载体.通过农杆菌介导的遗传转化分别获得17和21个植株,PCR鉴定阳性植株分别为16和20株.对T0代植株靶位点附近序列进行测序分析,结果表明OsMAP65-3s基因均被成功编辑,OsMAP65-3.12个位点编辑效率为17.50％和9.38％,OsMAP65-3.2编辑效率为15.62％和45.00％;T0代已获得osmap65-3.2、osmap65-3.2/OsMAP65-3.1(+/-)和OsMAP65-3.2(+/-)/OsMAP65-3.1(+/-)材料.本研究为进一步创制OsMAP65-3s突变体,开展基因功能研究和水稻胞质分裂分子机制解析奠定了理论基础.

水稻;胞质分裂;OsMAP65-3;CRISPR/Cas9;基因编辑

江西农业大学农学院/作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室/江西省超级稻工程技术研究中心/双季稻现代化生产协同中心,江西 南昌 330045

[1]林小丽;姜志树;贺榕;胡嘉敏;朱昌兰;周大虎;贺浩华;徐杰-.基于CRISPR/Cas9技术对水稻细胞质分裂关键基因OsMAP65-3s的编辑)[J].核农学报,2022(04):716-727

OsMAP65,MAP65,CSMAP65,双基因编辑,osmap65

CRISPR,Cas9,水稻,细胞质,胞质分裂,关键基因,3s,调节因子,靶位,同一个,3A,3B,农杆菌介导的遗传转化,植株,T0,测序分析,个位,编辑效率,创制,突变体,基因功能,功能研究,机制解析

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