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典型文献
利用CRIS PR/Cas9技术创制水稻中花11号dwarf1突变体
文献摘要:
[目的]水稻异源三聚体G蛋白α 亚基在植物生长与逆境应答中具有重要的生物学功能,在水稻中花11号品种中创制Gα 蛋白编码基因DWARF1(D1)的突变体,为水稻功能基因组学研究提供材料.[方法]在中花11号的D1基因座位上设计靶向其外显子的sgRNA序列,构建CRISPR/Cas9载体,转化中花11号胚愈伤组织,经过抗性愈伤组织筛选和诱导分化后,对再生植株进行鉴定.[结果]筛选到3个含有不同编辑形式的d1突变株系,实时荧光定量PCR分析发现,D1 mRNA水平显著降低,表明无义突变介导的D1 mRNA降解过程亦被触发.在3个d1突变株中进一步鉴定到不含潮霉素抗性基因、不含载体骨架的植株,繁育后可以得到无转基因痕迹、稳定遗传的d1敲除植株.对d1突变株的生长、发育情况进行观察发现,中花11号背景下d1突变株显著变矮、穗明显变小,株高和穗长为中花11号野生型的50%~60%.种子变小及变圆,同时,种子长宽比和千粒重降低约40%.[结论]获得有效移码突变的中花11号背景d1突变株系,为进一步研究G蛋白及其相关基因的功能创制遗传材料.
文献关键词:
Gα亚基;水稻;中花11号;突变体;CRISPR-Cas9
作者姓名:
冯彦钊;朱庆锋;薛皦;陈沛;于洋
作者机构:
广东省农业科学院农业生物基因研究中心/广东省农作物种质资源保存与利用重点实验室,广东广州 510640
文献出处:
引用格式:
[1]冯彦钊;朱庆锋;薛皦;陈沛;于洋-.利用CRIS PR/Cas9技术创制水稻中花11号dwarf1突变体)[J].广东农业科学,2022(11):110-118
A类:
DWARF1
B类:
Cas9,创制,水稻,dwarf1,突变体,异源,三聚体,亚基,植物生长,逆境应答,生物学功能,蛋白编码,编码基因,D1,功能基因组学,组学研究,基因座,座位,其外,外显子,sgRNA,CRISPR,愈伤组织,诱导分化,再生植株,d1,突变株,株系,无义突变,降解过程,潮霉素,抗性基因,体骨,繁育,转基因,痕迹,稳定遗传,敲除,发育情况,观察发现,株高,穗长,野生型,变圆,子长,长宽比,千粒重,得有,移码突变,白及
AB值:
0.40778
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