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免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定
文献摘要：
病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes,IdeS)oIdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病.本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性.结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶200(m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解.而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L-1,其与抗体IgG1以1∶200(m/m)在37℃反应30 min才可反应完全.C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发.上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发和作为工具酶用于IgG指纹分析的需求.
文献关键词：
免疫球蛋白G降解酶;异源表达;IgG指纹分析;供体特异性抗体
中图分类号：
作者姓名：
周思含;刘忞之;杨燕;王伟
作者机构：
中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生健康委员会天然药物生物合成重点实验室,北京100050
文献出处：
引用格式：
[1]周思含;刘忞之;杨燕;王伟-.免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定)[J].药学学报,2022(07):2234-2239
A类：
IdeS,oIdeS,SiBP
B类：
免疫球蛋白,蛋白降解酶,大肠杆菌,功能鉴定,链球菌,逃避,宿主,异地,immunoglobulin,degrading,enzyme,Streptococcus,pyogenes,工具酶,指纹,自身免疫反应,质粒,pCold,表达载体,Shuffle,T7,异源表达,亲和色谱,色谱纯化,蛋白活性,His6,IgG1,全酶,酶解,硅胶,药物研发,本系,重组蛋白,全能,体类,供体特异性抗体
AB值：
0.346036
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