目的 基于铁死亡探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对 HT22 细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的保护作用及机制.方法 采用HT22细胞制备H/R损伤模型.为了探究DEX对细胞H/R损伤的保护作用的最适浓度,HT22细胞分为5组:对照组(Control)、缺氧复氧组(H/R)、低浓度 DEX 组(H/R+DEX2.5,2.5 μmol·L-1)、中浓度DEX组(H/R+DEX5,5 μmol·L-1)、高浓度DEX组(H/R+DEX10,10 μmol·L-1),MTT法检测细胞的存活率.为了探讨DEX对HT22细胞H/R保护作用机制,将HT22细胞分为 4 组:Control 组、H/R 组、H/R+DEX5 组、H/R+DEX5+ML385(Nrf2抑制剂)组.MTT法检测细胞的存活率;使用FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe2+水平的变化;C11 BODIPY 581/591检测细胞中Lipid ROS的变化;使用丙二醛和还原型谷胱甘肽试剂盒检测细胞中MDA及GSH含量.蛋白免疫印记法检测细胞中核因子E2相关因子2(nu-clear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、转铁蛋白受体 1(transferrin receptor 1,TFR1)和胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族 7 成员 11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)的表达.结果 与Control组相比,H/R损伤后细胞的存活率、GSH含量、Nrf2、GPX4和SLC7A11蛋白表达明显降低(均 P＜0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和 TFR1 蛋白表达明显升高(均P＜0.01);与H/R组相比,低、中、高浓度DEX均可使H/R损伤后细胞的存活率、GSH含量、Nrf2、GPX4和SLC7 A11蛋白表达明显升高(均P＜0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和TFR1蛋白表达明显降低(均P＜0.05);在DEX的基础上使用ML385后,与H/R+DEX5组相比,细胞存活率、GSH的含量、Nrf2、GPX4和SLC7A11蛋白表达明显降低(均P＜0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和TFR1蛋白表达明显升高(均P＜0.05).结论 DEX可通过抑制铁死亡减轻HT22细胞H/R损伤,这种保护作用可能与其促进Nrf2的表达有关.

右美托咪定;缺氧复氧损伤;铁死亡;脑缺血/再灌注损伤;核因子E2相关因子2;谷胱甘肽过氧化物酶4

门运政;胡淼;刘刚;段方方;童旭辉;黄杰;金文静;董淑英

蚌埠医学院药学院药理学教研室,安徽 蚌埠 233030;蚌埠医学院第一附属医院麻醉科,安徽 蚌埠 233030;蚌埠医学院心脑血管疾病基础与临床重点实验室,安徽 蚌埠 233030

中国药理学通报

[1]门运政;胡淼;刘刚;段方方;童旭辉;黄杰;金文静;董淑英-.右美托咪定通过调控Nrf2减轻HT22细胞缺氧/复氧引起的铁死亡)[J].中国药理学通报,2022(10):1480-1486

R+DEX2,R+DEX5,R+DEX10,R+DEX5+ML385

右美托咪定,Nrf2,HT22,铁死亡,dexmedetomidine,hypoxia,reoxygenation,损伤模型,最适浓度,Control,MTT,保护作用机制,FerroOrange,荧光探针,Fe2+,C11,BODIPY,Lipid,ROS,还原型谷胱甘肽,试剂盒,GSH,免疫印,印记,记法,核因子,E2,相关因子,nu,clear,erythroid,related,谷胱甘肽过氧化物酶,glutathione,peroxidase,GPX4,转铁蛋白受体,transferrin,receptor,TFR1,谷氨酸,逆向转运,转运蛋白,溶质载体,solute,carrier,family,member,SLC7A11,细胞存活率,制铁,缺氧复氧损伤,脑缺血,再灌注损伤

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