目的 研究骨髓间充质干细胞来源外泌体(BMSCs-Exo)在炎症微环境中对巨噬细胞表型极化及软骨修复的调控作用.方法 收集BMSCs培养上清液,差速离心法提取BMSCs-Exo,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测ALG2相互作用蛋白X(Alix)、肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)表达;使用不同剂量的BMSCs-Exo(10 mg/L和50 mg/L)处理M1巨噬细胞(分为对照组、10 mg/L Exo组、50 mg/L Exo组)及白细胞介素(IL)-1β刺激的软骨细胞(分为对照组、模型组、IL-1β+10 mg/L Exo组、IL-1β+50 mg/L Exo组),CCK-8测定BMSCs-Exo促巨噬细胞、软骨细胞增殖能力;Western blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证BMSCs-Exo对M1型巨噬细胞表型极化的影响,炎性因子IL-1β、IL-6的表达水平,以及软骨细胞成软骨相关因子Ⅱ型胶原(COLⅡ)、基质金属蛋白酶(MMP)-13、转化生长因子(TGF)-β1的表达水平.结果 BMSCs-Exo为圆形双层囊泡,表达Alix、TSG101,可促进巨噬细胞增殖.与对照组比较,M1型巨噬细胞经BMSCs-Exo处理后,M1型极化标志物一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平降低,M2型极化标志物精氨酸酶-1(Arg-1)的表达水平升高(P<0.05);炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,炎症软骨细胞中的COLⅡ、TGF-β1表达升高,MMP-13表达水平降低(P<0.05).结论 BMSCs-Exo可调控M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化,降低炎性因子表达水平,促进炎症微环境中的软骨修复.

间充质基质细胞;外泌体;巨噬细胞;表型;炎症;骨髓间充质干细胞;软骨修复

邢逸;窦一鸣;王敏;徐海楠;杨强;孙逊;赵艳红

天津医科大学口腔医院 300070;天津大学天津医院

天津医药

[1]邢逸;窦一鸣;王敏;徐海楠;杨强;孙逊;赵艳红-.骨髓间充质干细胞来源外泌体对炎症微环境中巨噬细胞表型及软骨细胞的调控作用)[J].天津医药,2022(04):343-349

ALG2

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