目的 基于核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号探讨黄芩苷调控气道上皮黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的表达以改善病理性气道黏液的机制.方法 采用MTT法检测不同浓度黄芩苷对H292细胞(人肺癌细胞)活性的影响并确定用于后续实验的黄芩苷浓度;将细胞分为空白对照组、模型组、NF-KB抑制剂组(PDTC组,100 μmol/L)和黄芩苷组(200 μg/mL).采用IL-1β诱导H292细胞建立体外黏液高分泌炎症细胞模型,再以相应浓度的药物干预24 h后,采用ELISA方法检测各组细胞上清中MUC5AC、IL-8、TNF-α的含量,检测各组细胞中MUC5AC和CFTR蛋白的含量;采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中MUC5AC和CFTR mRNA的表达;采用Western blot检测各组细胞中p65和IκB的表达.结果 MTT检测结果显示,当黄芩苷浓度为200 μg/mL时,细胞活性在80％以上,可作为后续实验的安全浓度.与空白对照组比较,模型组细胞培养上清及细胞质中MUC5AC分泌水平及IL-8、TNF-α、p65、MUC5AC mRNA表达均明显升高(P＜0.05),IκB蛋白表达、CFTR蛋白含量、CFTR mRNA的表达显著降低(P＜0.05);与模型组比较,PDTC组细胞培养上清中MUC5AC分泌水平,IL-8、TNF-α、p65蛋白表达及MUC5AC mRNA表达显著降低(P＜0.05),细胞质中MUC5AC水平、CFTR蛋白含量、IκB蛋白表达、CFTR mRNA的表达显著升高(P＜0.05);与模型组比较,黄芩苷组细胞培养上清中MUC5AC分泌水平、IL-8和TNF-α分泌水平、p65蛋白表达降低(P＜0.01),CFTR蛋白含量、IκB蛋白表达、CFTR mRNA表达均显著增加(P＜0.01),而MUC5AC mRNA表达差异无统计学意义.结论 黄芩苷通过抑制NF-κB活性,减少MUC5AC的分泌,增加CFTR的表达,减轻气道炎症.

黄芩苷;NF-κB;MUC5AC;囊性纤维化跨膜传导调节因子;气道黏液

张艳;张彩丽;刘燕;陈玉龙;彭梦薇;桑亚洲;吴耀松

450046郑州,河南中医药大学中医药科学院,河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室;河南省中西医结合防治脑认知疾病工程技术研究中心;郑州市中西医结合防治脑认知疾病重点实验室

陆军军医大学学报

[1]张艳;张彩丽;刘燕;陈玉龙;彭梦薇;桑亚洲;吴耀松-.黄芩苷通过NF-κB信号对气道上皮黏液调节因子MUC5AC和CFTR表达的影响)[J].陆军军医大学学报,2022(05):441-447

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