目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(bladder cancer-associated transcript 1,BLACAT1)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞化疗耐药中的作用.方法 通过顺铂诱导喉癌细胞株Hep-2,建立顺铂耐药喉癌细胞模型(Hep-2/R).实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中lncRNA BLACAT1、微小RNA-142(microRNA-142,miR-142)和自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,ATG7)mRNA的表达;Western blot检测细胞中ATG7、多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MRP1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)-II/LC3-I和Beclin 1的表达;MTT实验检测细胞活力.双荧光素酶报告基因实验分别检测BLACAT1和miR-142及miR-142和ATG7之间的靶向作用.结果 Hep-2/R组细胞中lncRNA BLACAT1表达水平(3.58±0.47)显著高于Hep-2组(1.00±0.06),差异有统计学意义(t=9.431,P<0.05).Hep-2/R组细胞中miR-142表达水平(0.35±0.04)显著低于Hep-2组(1.00±0.05),差异有统计学意义(t=17.583,P<0.05).与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组Hep-2细胞活力显著升高;与NC-siRNA组比较,BLACAT1-siRNA组Hep-2/R细胞活力显著降低.与WT-BLACAT1和NC mimic共转染组相比,WT-BLACAT1和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=10.832,P<0.05);与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组细胞中miR-142表达显著降低;与WT-ATG7和NC mimic共转染组相比,WT-ATG7和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=8.203,P<0.05);与NC mimic组比较,miR-142 mimic组细胞中ATG7蛋白水平均显著降低.使用自噬抑制剂3-MA处理Hep-2细胞后,pcDNA-BLACAT1显著促进自噬蛋白ATG7、LC3-II/LC3-I和Beclin 1的表达,miR-142 mimic处理后自噬蛋白水平降低.使用DDP处理Hep-2/R细胞后,BLACAT1-siRNA显著抑制Hep-2/R细胞活力和MRP1蛋白的表达,而miR-142 inhibitor逆转这一结果.结论 LncRNA BLACAT1通过miR-142/ATG7信号通路促进LSCC细胞的自噬和化疗耐药性.

喉肿瘤;耐药性;药物耐受性;长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1;微小RNA-142;自噬

张正艳;马文学;齐静静;代红磊

荆门市第二人民医院耳鼻咽喉科,湖北 荆门 448000

中国耳鼻咽喉头颈外科

[1]张正艳;马文学;齐静静;代红磊-.长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1通过微小RNA-142/自噬相关蛋白7调节自噬对喉癌细胞化疗耐药的影响)[J].中国耳鼻咽喉头颈外科,2022(08):483-488

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