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基于OPG/RANK/RANKL信号通路探究益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化的影响
文献摘要:
目的 探讨益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响及其作用机制.方法 给予大鼠分别灌胃益肾健骨颗粒、生理盐水1周,制备含药血清及正常血清.采用背侧双切口切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松模型,分离并培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定BMSCs,将BMSCs细胞随机分为对照组(N组)、含药血清组(J组)、含药血清+si-NC组(J+C组)、含药血清+si-OPG组(J+O组),按组进行相应处理,对各组BMSCs进行诱导成骨分化,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色与茜素红S染色法检测ALP活性及矿化结节数,实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-qPCR)检测ALP、Runt相关转录因子2(Runt-associated transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA表达,Western blot检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B,RANK)、RANK配体(RANK ligand,RANKL)蛋白表达.结果 成骨分离绝经后骨质疏松大鼠BMSCs,并通过形态及CD29、CD44、CD45、CD34表达鉴定;与N组比较,J组与J+C组细胞染色加深,ALP活性、矿化结节数、ALP、Runx2、OCN mRNA表达水平及OPG蛋白表达水平显著升高(P<0.05),RANK、RANKL蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与J组、J+C组比较,J+O组细胞ALP染色变浅,ALP活性、矿化结节数、ALP、Runx2、OCN mRNA表达水平及OPG蛋白表达水平显著降低(P<0.05),RANK、RANKL蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 益肾健骨颗粒通过调节OPG/RANK/RANKL信号通路,促进绝经后骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化.
文献关键词:
益肾健骨颗粒;经后骨质疏松;OPG/RANK/RANKL信号通路;骨髓间充质干细胞;成骨分化
中图分类号:
作者姓名:
刘勇;易振宇;张信成
作者机构:
湖南省中西医结合医院医保科,湖南 长沙 410006;湖南省中西医结合医院脊柱骨肿瘤科,湖南 长沙 410006;湖南省中西医结合医院创伤关节科,湖南 长沙 410006
文献出处:
引用格式:
[1]刘勇;易振宇;张信成-.基于OPG/RANK/RANKL信号通路探究益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化的影响)[J].湖南中医药大学学报,2022(08):1277-1282
A类:
益肾健骨颗粒,J+C,J+O
B类:
OPG,RANKL,绝经后骨质疏松,BMSCs,成骨分化,骨髓间充质干细胞,bone,marrow,mesenchymal,stem,cells,灌胃,生理盐水,含药血清,背侧,双切口,养大,流式细胞术,+si,NC,碱性磷酸酶,alkaline,phosphatase,ALP,茜素红,染色法,矿化结节,节数,real,qPCR,Runt,associated,transcription,Runx2,骨钙素,osteocalcin,OCN,blot,骨保护素,osteoprotegerin,核因子,活化因子,receptor,activator,nuclear,kappa,ligand,CD29,CD44,CD45,CD34,细胞染色,蛋白表达水平,色变,变浅
AB值:
0.217463
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