目的 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),运用桃红四物汤含药血清和Hippo信号通路抑制剂Verteporfin干预,进而观察BMSCs增殖和成骨分化的能力.方法 采用全骨髓贴壁法体外培养BMSCs,选用10倍等效剂量的桃红四物汤灌服大鼠制备桃红四物汤含药血清,采取0.9％氯化钠注射液灌胃大鼠制取空白组对照血清,将BMSCs分为3组:空白血清组、桃红四物汤含药血清组(THSWT组)以及桃红四物汤含药血清+Verteporfin组(THSWT+V组),使用CCK-8分析法分析4个时相点0、1、3、7 d细胞增殖活力;干预7 d后,进行ALP测定,观察骨向分化程度;处理21 d后,进行茜素红染色,观察钙积累,Western blotting法检测各组细胞成骨关键因子及Hippo通路关键蛋白表达.结果 THSWT组BMSCs细胞增殖能力明显高于THSWT+V组及空白血清组(P＜0.01);THSWT组BMSCs成骨分化能力及钙盐沉积程度高于THSWT+V组及空白血清组;THSWT组中YAP蛋白表达低于空白血清组、TAZ蛋白表达高于空白血清组(P＜0.05);THSWT组ALP、OCN、RUNX2、Osterix等成骨关键因子蛋白表达明显高于THSWT+V组及空白血清组(P＜0.05).结论 桃红四物汤可促进BMSCs的增殖和成骨分化能力,从而促进骨折愈合,其作用机制为调节Hippo-YAP信号通路,激活其下游关键节点YAP蛋白及TAZ蛋白,诱导BMSCs成骨分化基因转录.

骨折;桃红四物汤;BMSCs;Hippo-YAP信号通路;成骨分化;大鼠

周文佳;尚云峰;朱文新;杨卓;卢雪笛;申楠;向黎黎;陆小龙;熊辉

湖南省岳阳市中心医院,湖南岳阳414000;湖南省常德市第一中医院,湖南常德415000;湖南中医药大学第二附属医院,湖南长沙410005;湖南中医药大学,湖南长沙410007

中国中医急症

[1]周文佳;尚云峰;朱文新;杨卓;卢雪笛;申楠;向黎黎;陆小龙;熊辉-.基于Hippo-YAP信号通路探讨桃红四物汤对BMSCs增殖与成骨分化的影响)[J].中国中医急症,2022(04):576-579

THSWT,+Verteporfin,THSWT+V

Hippo,YAP,桃红四物汤,BMSCs,成骨分化,分离培养,养大,骨髓间充质干细胞,含药血清,信号通路抑制剂,全骨髓贴壁法,体外培养,等效剂量,氯化钠注射液,灌胃,制取,白血,CCK,细胞增殖活力,ALP,骨向分化,分化程度,茜素红,钙积,blotting,关键因子,关键蛋白,细胞增殖能力,分化能力,钙盐,沉积程度,TAZ,OCN,RUNX2,Osterix,骨折愈合,关键节点,白及,基因转录

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