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典型文献
转录因子GATA结合蛋白3对哮喘易感基因ADAM33表达的影响
文献摘要:
目的:探讨转录因子GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)对解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因启动子活性及mRNA表达的影响.方法:以人正常肺上皮BEAS-2B细胞DNA为模板经PCR扩增得到ADAM33基因启动子区1953 bp片段.通过双酶切、连接、转化等步骤将该片段克隆至pGL3-Basic载体构建ADAM33启动子重组质粒,并将其转染至人HEK293T、BEAS-2B细胞中;利用双荧光素酶报告基因技术检测HEK293T、BEAS-2B细胞中所构建的质粒启动子活性.将HEK293T、BEAS-2B细胞分为pcDNA-GATA3组和pcDNA3.1对照组,分别转染GATA3过表达质粒和空白对照质粒,用双荧光素酶报告基因技术检测荧光素酶活性;用实时荧光定量PCR检测BEAS-2B细胞中ADAM33 mRNA相对表达水平.结果:通过PCR、双酶切和测序鉴定,成功构建含ADAM33启动子片段的重组质粒;重组质粒的ADAM33启动子活性较pGL3-Basic对照组明显增高.与pcDNA3.1组相比,HEK293T、BEAS-2B细胞中pcDNA-GATA3组ADAM33启动子区荧光素酶活性明显增高(P<0.05或P<0.01);BEAS-2B细胞中pcDNA-GATA3组ADAM33 mRNA相对表达水平明显增高(P<0.01).结论:转录因子GATA3上调哮喘易感基因ADAM33启动子活性及mRNA表达.
文献关键词:
启动子活性;GATA结合蛋白3;解整合素金属蛋白酶33;哮喘;BEAS-2B细胞
作者姓名:
芮菲菲;杜娟;郝忠分;马世奇;王雯;束进
作者机构:
江苏大学第四附属医院儿科,江苏 镇江212001
引用格式:
[1]芮菲菲;杜娟;郝忠分;马世奇;王雯;束进-.转录因子GATA结合蛋白3对哮喘易感基因ADAM33表达的影响)[J].江苏大学学报(医学版),2022(02):131-135
A类:
B类:
结合蛋白,哮喘,易感基因,ADAM33,binding,GATA3,整合素,金属蛋白酶,disintegrin,metalloproteinase,启动子活性,BEAS,2B,基因启动子区,bp,双酶,该片,pGL3,Basic,载体构建,重组质粒,转染,HEK293T,双荧光素酶报告基因,基因技术,pcDNA3,过表达质粒,空白对照,荧光素酶活性,相对表达
AB值:
0.181767
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