典型文献
基本螺旋-环-螺旋家族成员a15通过Ⅺ型胶原蛋白α1链基因调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移
文献摘要:
目的:探讨Ⅺ型胶原蛋白α1链(COL11A1)基因是否为基本螺旋-环-螺旋家族成员a15(MIST1)调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移的关键靶基因。方法:采用Chip-seq(染色质免疫沉淀-测序)筛选MIST1在胰腺癌中的候选靶基因得到COL11A1基因;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)对过表达MIST1的胰腺癌细胞进行验证MIST1对COL11A1基因的调控作用;采用染色质免疫共沉淀技术(ChIP)和双荧光素酶报告基因实验明确MIST1和COL11A1的结合域;Transwell实验(侵袭实验)、细胞划痕实验、四唑盐比色法(MTT)、细胞集落形成实验和动物实验研究COL11A1的表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响;收集胰腺癌和癌旁组织样本,通过RT-qPCR和Western blot研究其COL11A1的mRNA和蛋白表达水平;用癌症基因组图谱(TCGA)来评估COL11A1的表达对胰腺癌患者预后的影响。组间比较采用
t检验或方差分析。
结果:对TCGA胰腺癌数据根据COL11A1表达水平分组后生存分析显示高COL11A1表达与胰腺癌预后不良呈正相关[风险比(
HR)=2.30,
P<0.05];MIST1的-N端与COL11A1启动子相互作用并抑制其转录,MIST1-N端突变后诱发的荧光酶活性(1.08±0.22)与对照组(1.00±0.00)比较,差异无统计学意义(
t=0.608,
P>0.05);Transwell实验显示COL11A1敲低组在PANC-1、BxPC-3和SW1990细胞系中细胞穿膜数为(98.33±9.56)、(95.00±8.67)、(104.00±11.73)个/视野,均低于对照组[(562.00±37.33)、(793.67±67.29)、(504.00±37.39)个/视野,
t=20.841、17.836、17.680,
P<0.01];细胞划痕实验显示COL11A1敲低组划痕愈合率为(63.39±5.71)%、(49.66±4.22)%、(53.33±8.92)%,低于对照组[(89.42±4.25)%、(78.39±7.73)%、(82.98±7.09)%,
t=6.334、5.847、4.507,
P<0.01];MTT测定和集落形成实验结果显示COL11A1敲低组集落形成个数为(19.00±4.55)、(41.00±7.33)、(21.33±4.07)/个,低于对照组[(43.33±9.27)、(87.67±10.39)、(69.00±9.85)/个,
t=4.080、6.357、7.747,
P<0.05]。
结论:MIST1通过COL11A1基因调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移。
文献关键词:
Ⅺ型胶原蛋白α1链;A类碱性螺旋-环-螺旋蛋白15;上皮-间充质转化;胰腺癌
中图分类号:
作者姓名:
孙莹;李扬;刘志强;李永峰;勾善淼
作者机构:
华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科,武汉 430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科,武汉 430022
文献出处:
引用格式:
[1]孙莹;李扬;刘志强;李永峰;勾善淼-.基本螺旋-环-螺旋家族成员a15通过Ⅺ型胶原蛋白α1链基因调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移)[J].中华实验外科杂志,2022(08):1527-1530
A类:
a15,MIST1
B类:
胶原蛋白,基因调控,胰腺癌细胞,侵袭与转移,COL11A1,关键靶基因,Chip,seq,染色质免疫沉淀,聚合酶链反应,蛋白质印迹法,blot,过表达,染色质免疫共沉淀技术,ChIP,双荧光素酶报告基因实验,验明,Transwell,细胞划痕实验,四唑,比色法,MTT,集落形成,动物实验研究,细胞生物学行为,癌旁组织,qPCR,蛋白表达水平,癌症基因组图谱,TCGA,生存分析,预后不良,风险比,启动子,敲低,PANC,BxPC,SW1990,细胞系,愈合率
AB值:
0.195934
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