目的 探究虫草菌丝对CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型的干预作用,及对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路与血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)的影响.方法 将60只SPF级雄性C57/BL6J小鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组及虫草菌丝低、中、高剂量组,每组各10只.模型组和各用药组注射15％CCl4-橄榄油,造模6周.在第4周首日开始给药,连续3周.分别采用血生化法检测小鼠血清ALT、AST、TBil水平或活性,HE和SR染色观察肝组织病理学,碱水解法测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量情况,PCR检测α-SMA、Col-Ⅰ的mRNA表达情况,免疫组化测定肝组织α-SMA、Col-Ⅰ与ANGPTL4蛋白表达,Western Blot检测α-SMA、ANGPTL4、TLR4、NF-κB/P-NF-κB、CD163蛋白的表达.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST、TBil水平均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较,虫草菌丝高剂量组显著改善小鼠肝纤维化程度,血清ALT、AST、TBil水平均显著减少(P值均<0.05).HE染色发现虫草菌丝高剂量组能显著减少肝组织炎性细胞浸润.SR染色发现,虫草菌丝高剂量组明显减轻肝脏胶原沉积.与正常组比较,模型组肝组织HYP含量、SR阳性染色面积比均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较,虫草菌丝高剂量组肝组织HYP含量、SR阳性染色面积比均显著减小(P值均<0.05).与正常组比较,免疫组化、PCR和Western Blot结果显示模型组肝组织中α-SMA和Col-ⅠmRNA及蛋白表达显著增加(P值均<0.01);与模型组比较,虫草菌丝高剂量组肝组织中α-SMA、Col-Ⅰ胶原纤维表达均显著减少(P值均<0.05).与正常组比较,模型组肝组织ANGPTL4、TLR4、P-NF-κB/NF-κB、CD163蛋白表达均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较,虫草菌丝高剂量组肝组织ANGPTL4、TLR4、P-NF-κB/NF-κB、CD163蛋白含量均显著降低(P值均<0.05).结论 虫草菌丝对CCl4诱导的小鼠肝纤维化具有显著治疗作用,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路及抑制肝组织ANGPTL4表达相关.

肝硬化;血管生成素类;Toll样受体4;NF-κB

张霖璋;张定棋;徐莹;杨海琳;戚胜兰;张聪聪;陈佳美;刘平;刘伟

上海中医药大学附属曙光医院,肝病研究所,肝肾疾病病证教育部重点实验室,上海市中医临床重点实验室,上海201203;上海中医药大学 交叉科学研究院,上海201203;上海中医药大学 教学实验中心,上海201203

临床肝胆病杂志

[1]张霖璋;张定棋;徐莹;杨海琳;戚胜兰;张聪聪;陈佳美;刘平;刘伟-.虫草菌丝通过抑制TLR4/NF-κB信号通路与血管生成素样蛋白4对肝纤维化小鼠模型的保护作用)[J].临床肝胆病杂志,2022(07):1540-1547

血管生成素类

虫草,草菌,菌丝,TLR4,血管生成素样蛋白,小鼠模型,CCl4,干预作用,Toll,样受体,核转录因子,ANGPTL4,SPF,C57,BL6J,扶正化瘀方,高剂量,药组,橄榄油,首日,用血,血生化,生化法,小鼠血清,ALT,AST,TBil,HE,SR,肝组织病理学,碱水解法,羟脯氨酸,HYP,SMA,Col,免疫组化,Blot,CD163,单因素方差分析,LSD,肝纤维化程度,炎性细胞浸润,胶原沉积,染色面积比,胶原纤维,蛋白含量,治疗作用,肝硬化

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