目的 探究高压氧(HBO)联合血红蛋白(Hb)对高糖诱导的血管内皮细胞活力、侵袭、迁移及小管形成能力的影响及其调控机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),CCK-8法检测不同剂量血红蛋白(2、4、6、8、10μmol/L)和高压氧(0.10、0.15、0.20、0.25 Mpa)对HUVECs细胞活力的影响.建立高糖诱导的HUVECs细胞模型,分为6组:对照组(5.5 mmol/L葡萄糖处理48 h),甘露醇组(27.5 mmol/L甘露醇处理48 h),高糖组(33 mmol/L葡萄糖处理48 h),高糖+0.25 Mpa高压氧组,高糖+6μmol/L血红蛋白组,高糖+0.25 Mpa高压氧+6μmol/L血红蛋白组.通过CCK-8法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH水平;TUNEL染色观察细胞凋亡情况;免疫印迹(Western blot)法检测凋亡相关蛋白表达;划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;小管形成实验检测血管生成;最后通过Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达.结果 随着血红蛋白或高压氧剂量的不断增加,HUVECs细胞活力未发生显著变化.与对照组相比,高糖组HUVECs细胞活力、迁移、侵袭和小管形成能力下降,LDH水平升高,凋亡率增加,且Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达减少,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达增加.与高糖组相比,高糖+0.25 Mpa高压氧组和高糖+6μmol/L血红蛋白组细胞活力、迁移、侵袭和小管形成能力升高,LDH水平降低,凋亡率下降,且Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达增加,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达减少;而高压氧和血红蛋白两者联合作用时,影响更为显著.结论 高压氧联合血红蛋白促进高糖作用下HU-VECs的细胞活力、侵袭、迁移及小管形成能力并抑制细胞凋亡,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路有关.

高压氧;血红蛋白;高糖;人脐静脉内皮细胞;小管生成;Nrf2/HO-1通路

韩庆林;钱泳全;马洪东

南通大学附属医院骨科,南通 226001

华中科技大学学报（医学版）

[1]韩庆林;钱泳全;马洪东-.高压氧联合血红蛋白对高糖引起的血管内皮细胞损伤的作用)[J].华中科技大学学报（医学版）,2022(06):798-804

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