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高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化
文献摘要：
目的 探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化的作用与机制.方法 正常糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48 h,收集上清液提取并鉴定外泌体;观察人急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)巨噬细胞是否吞噬PKH67标记的外泌体;通过检测诱导性氮氧化物合酶(iNOS)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、甘露醇受体(CD206)的表达,以确定分化为M1和M2型巨噬细胞的最佳浓度及时间点;激光共聚焦检测CD206与α-SMA、IV型胶原(Col-IV)、纤维连接蛋白(FN)的荧光共表达.qRT-PCR与ELISA法测定转化生长因子受体-β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6水平.Western blot测定TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白表达.结果 上清液离心获取标本后检测到白细胞分化抗原群63(CD63)和肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)阳性、内质网分子伴侣蛋白(Calnexin)阴性,确认为外泌体并且纯度较高;THP-1巨噬细胞能够吞噬各组外泌体;各组外泌体刺激的最佳浓度为40 mg/L、最佳时间为96 h.高糖外泌体刺激24 h巨噬细胞以M1型为主,96 h则以M2型为主.与正常糖组相比,高糖组M2型巨噬细胞CD206、α-SMA、Col-IV、FN的荧光表达均增强,TGF-β1、IL-10的表达和分泌水平均上调(均P<0.05),IL-6的表达和分泌则下调(P<0.05),TGF-β1、p-Smad3蛋白表达也显著升高(均P<0.05).结论 高糖环境下HK2分泌的外泌体能够诱导M2型巨噬细胞向肌成纤维细胞转化,其机制可能与TGF-β1/Smad3信号通路的激活相关.
文献关键词：
外泌体;巨噬细胞;肌成纤维细胞
中图分类号：
作者姓名：
王东;吴永贵;齐向明
作者机构：
安徽医科大学第一附属医院肾脏内科,合肥 230022;随州市中心医院肾脏内科,随州 441300
文献出处：
引用格式：
[1]王东;吴永贵;齐向明-.高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化)[J].安徽医科大学学报,2022(06):847-854
A类：
B类：
高糖环境,外泌体,巨噬细胞,肌成纤维细胞,细胞转化,作用与机制,别处,人肾小管上皮细胞,HK2,上清液,人急性单核细胞白血病,细胞株,THP,吞噬,PKH67,诱导性,氮氧化物,iNOS,平滑肌肌动蛋白,SMA,甘露醇,CD206,M1,M2,最佳浓度,共聚,IV,Col,纤维连接蛋白,FN,共表达,qRT,转化生长因子,TGF,blot,Smad3,白细胞分化抗原,CD63,易感基因,TSG101,内质网,分子伴侣,伴侣蛋白,Calnexin,光表,泌水
AB值：
0.290427
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