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精细化检测原代皮质神经元细胞氧糖剥夺再复氧后自噬流的变化
文献摘要：
目的 用几种高度精细灵敏的方法检测氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后神经元自噬流不同阶段的变化.方法 原代皮质神经元细胞经过OGD/R后将实验分为OGD/R组及OGD/R+bafilomycin A1(BafA1)组,用RFP-GFP串联荧光标记LC3基因转染检测自噬小体和溶酶体的融合情况,透射电子显微镜(TEM)观察自噬的超微结构,SQSTM1/p62结合LC3蛋白翻转实验检测p62与LC3蛋白的定量,p62免疫染色观测其分布与含量.结果 荧光显微镜下OGD/R组自噬溶酶体与自噬小体比值明显增高;TEM可观测到不同阶段的自噬结构变化;可溶性p62的比值结合LC3Ⅱ/Ⅰ的比值共同反映了自噬流的活化;p62荧光染色后在BafA1组中分布居多.结论 每种方法各有其优点,不同方法和指标能够精准地反映神经元OGD/R后自噬流在不同阶段的具体变化,掌握并应用好这些方法能有效从自噬角度探索中枢神经系统疾病.
文献关键词：
皮质神经元细胞;自噬;自噬流;OGD/R;检测
中图分类号：
作者姓名：
张磊;戴朝;韩延峰;李阳;胡玉奇;陈富雷;赵冬
作者机构：
石河子大学第一附属医院神经外科,石河子 832000;新疆生产建设兵团第十师北屯医院外科,北屯 836000;新疆生产建设兵团第十师疾病预防控制中心,北屯836000
文献出处：
引用格式：
[1]张磊;戴朝;韩延峰;李阳;胡玉奇;陈富雷;赵冬-.精细化检测原代皮质神经元细胞氧糖剥夺再复氧后自噬流的变化)[J].安徽医科大学学报,2022(02):182-186
A类：
R+bafilomycin
B类：
原代,皮质神经元细胞,氧糖剥夺再复氧,自噬流,OGD,神经元自噬,BafA1,RFP,GFP,荧光标记,LC3,基因转染,自噬小体,透射电子显微镜,TEM,超微结构,SQSTM1,p62,实验检测,免疫染色,荧光显微镜,显微镜下,自噬溶酶体,荧光染色,不同方法,中枢神经系统疾病
AB值：
0.239162
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