典型文献
向日葵HaLACS1的克隆、表达及酵母功能互补鉴定
文献摘要：
探究长链酰基辅酶A合成酶(long chain acyl-CoA synthetase,LACS)基因在向日葵(Helianthus annuus L.)油脂积累和逆境响应中的功能,为其在向日葵油脂合成和抗逆中的应用奠定基础.通过RT-PCR克隆得到向日葵HaLACS1的CDS序列,运用生物信息学方法分析HaLACS1的特点.利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测HaLACS1的组织表达特性及对NaCl、PEG和ABA的响应情况.通过构建GFP和HaLACS1的融合表达载体,转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位分析.将HaLACS1转入酿酒酵母突变型菌株YB525中进行功能互补试验,并进行底物偏好性分析.结果显示,HaLACS1开放阅读框1980 bp,编码659个氨基酸.蛋白进化树分析表明,HaLACS1与拟南芥AtLACS1和莴苣(Lactuca sativa)LsLACS1具有较高的相似性.拟南芥原生质体瞬时表达分析显示HaLACS1定位于内质网.实时荧光定量PCR结果显示,HaLACS1在所有组织中均有表达,但在种子发育的早期表达量较高,花次之.NaCl、PEG和ABA处理均能诱导HaLACS1在向日葵根、茎和叶中的表达.酵母功能互补试验证明HaLACS1蛋白具有LACS酶活性.底物偏好性分析表明HaLACS1偏好棕榈酸(C16:0)和油酸(C18:1).表明HaLACS1与向日葵种子发育过程中的油脂积累和非生物胁迫响应相关.
文献关键词：
向日葵;HaLACS1;亚细胞定位;表达模式;酵母功能互补
中图分类号：
作者姓名：
杨佳宝;周至铭;张展;冯丽;孙黎
作者机构：
石河子大学生命科学学院,石河子 832003;兵团兴新职业技术学院,巴州 841007
文献出处：
引用格式：
[1]杨佳宝;周至铭;张展;冯丽;孙黎-.向日葵HaLACS1的克隆、表达及酵母功能互补鉴定)[J].生物技术通报,2022(06):147-156
A类：
HaLACS1,YB525,AtLACS1,LsLACS1
B类：
向日葵,酵母功能互补,长链,酰基,基辅,辅酶,合成酶,long,chain,acyl,CoA,synthetase,Helianthus,annuus,油脂积累,逆境响应,油脂合成,抗逆,CDS,生物信息学方法,qRT,组织表达特性,NaCl,PEG,ABA,GFP,融合表达,表达载体,拟南芥,原生质体,亚细胞定位,定位分析,转入,酿酒酵母,突变型,底物偏好,偏好性分析,开放阅读框,bp,进化树分析,莴苣,Lactuca,sativa,瞬时表达,表达分析,内质网,有组织,种子发育,棕榈酸,C16,油酸,C18,非生物胁迫,胁迫响应,表达模式
AB值：
0.313363
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