为探究sRNA GcvB与伴侣蛋白Hfq对靶基因stm4351的调控作用,通过λred同源重组、FLP/FRT重组和转导构建了基因缺失菌株Δstm4351∷lacZ、stm4351ΔgcvB∷cat、stm4351Δhfq∷tetRA、stm4351Δhfq∷tetRAΔgcvB∷cat,并通过β-半乳糖苷酶(LacZ)试验和荧光定量PCR试验测定了gcvB与hfq缺失后LacZ活性和stm4351转录水平的变化情况.β-半乳糖苷酶试验结果显示:gcvB或hfq缺失菌株的LacZ活性均升高,表明stm4351基因的蛋白表达水平升高;hfq缺失菌株的LacZ活性高于gcvB缺失菌株;hfq和gcvB同时缺失后,LacZ活性比单缺失菌株高.荧光定量PCR结果显示:hfq缺失后,stm4351的转录量极显著下降;而gcvB缺失及hfq和gcvB同时缺失对stm4351转录量的影响不显著.以上结果说明:GcvB、Hfq均对stm4351的表达存在抑制作用;在Hfq的辅助作用下,GcvB对stm4351表达的抑制作用增强;Hfq协同GcvB对stm4351的调控途径可能有2种或更多;同时,Hfq对stm4351的保护或激活作用可能受到GcvB的影响.

沙门菌;GcvB;Hfq;靶基因;调控机理

张家莉;杨阳;潘永;段世宇;令狐远凤;杨琦

贵州大学动物科学学院;贵州大学动物疫病研究所;贵州省动物疫病研究室,贵州 贵阳550025

福建农林大学学报（自然科学版）

[1]张家莉;杨阳;潘永;段世宇;令狐远凤;杨琦-.沙门菌sRNA GcvB及伴侣蛋白Hfq对靶基因stm4351的调控作用)[J].福建农林大学学报（自然科学版）,2022(03):381-386

GcvB,stm4351,gcvB,tetRA

沙门菌,sRNA,伴侣蛋白,Hfq,对靶,靶基因,red,同源重组,FLP,FRT,转导,基因缺失菌株,lacZ,cat,hfq,半乳糖,糖苷酶,LacZ,转录水平,蛋白表达水平,株高,辅助作用,调控途径,调控机理

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