背景:老年缺血性心脏损伤患者自体干细胞移植治疗效果欠佳,需要探索提高老年干细胞修复再生能力的有效途径.目的:探讨低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对心肌的保护作用,为改善老年患者自体干细胞移植疗效提供实验支持.方法:将青年人骨髓间充质干细胞置于常氧培养箱培养,老年人骨髓间充质干细胞分别置于常氧和低氧培养箱培养,收集条件培养基分为青年常氧培养基组、老年常氧培养基组和老年低氧培养基组.H9C2细胞用3种条件培养基在常氧培养箱中培养24 h后,加入300μmol/L过氧化氢继续培养30 min诱导氧化应激,采用CCK-8法检测细胞活性,活性氧试剂盒检测活性氧水平反映氧化应激损伤程度,Western blot检测Bax、Bcl-2表达量反映细胞凋亡水平,Western blot检测p-AKT表达量反映AKT活化水平.另外,老年低氧培养基处理及过氧化氢诱导细胞氧化应激前,用含50μmol/L LY294002的DMEM培养液培养2 h,以阻断PI3K/AKT通路的激活,然后采用CCK-8法检测细胞活性.结果 与结论:①与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞活力显著增加(P<0.01);凋亡相关蛋白Bax表达显著降低(P<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达显著增高(P<0.05);活性氧水平显著降低(P<0.05);②与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞中p-AKT蛋白表达显著增高(P<0.05);③与老年低氧培养基组比较,应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,H9C2细胞活力下降(P<0.05);④结果提示,低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基通过AKT通路减弱H9C2细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,提高细胞活性.

干细胞;人骨髓间充质干细胞;老年;条件培养基;低氧;预处理;H9C2细胞;AKT;氧化应激

宋慧芳;谈佳音;康毅;李斌;毕志斐;龙女;夏仲年;郭蕊

山西医科大学,第一医院,山西省太原市 030001;山西医科大学,人体解剖学教研室,山西省太原市 030001;山西医科大学,山西省肿瘤医院,山西省太原市 030001;山西医科大学,形态学实验室,山西省太原市 030001

中国组织工程研究

[1]宋慧芳;谈佳音;康毅;李斌;毕志斐;龙女;夏仲年;郭蕊-.低氧预处理增强老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对H9C2细胞氧化应激损伤的保护作用)[J].中国组织工程研究,2022(01):1-6

低氧预处理,人骨髓间充质干细胞,间充质干细胞条件培养基,H9C2,氧化应激损伤,缺血性,心脏损伤,伤患,自体干细胞移植,移植治疗,干细胞修复,修复再生,再生能力,老年患者,青年人,常氧,培养箱,集条,基组,CCK,细胞活性,试剂盒,活性氧水平,平反,blot,Bax,Bcl,AKT,活化水,LY294002,DMEM,培养液,PI3K,细胞活力,凋亡相关蛋白

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