目的 研究SMYD2抑制剂LLY-507对小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1)及人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨分化的影响.方法 通过CCK-8法检测LLY-507对MC3T3-E1和hMSCs增殖的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定检测不同浓度LLY-507干预下MC3T3-E1和hMSCs早期成骨分化标志物ALP的活性情况;通过茜素红染色及半定量分析检测LLY-507对MC3T3-E1和hMSCs矿化能力的影响;运用荧光定量PCR检测hMSCs的成骨相关基因Osterix、Runx2、OPG、OPN mRNA的表达;Western blot检测hMSCs的Runx2和SMYD2蛋白表达量.结果 CCK-8结果表明LLY-507在0.8μmol/L的剂量下细胞活性无明显影响,不会明显抑制细胞增殖.ALP染色及活性测定表明,加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d后能够明显抑制MC3T3-E1及hMSCs成骨分化以及碱性磷酸酶的表达(P<0.05);茜素红染色及半定量分析表明100 nmol/L剂量的LLY-507能够明显抑制MC3T3-E1及hMSCs的矿化能力(P<0.05).通过qPCR,加入25 nmol/L及以上剂量的LLY-507分别干预7 d和14 d后能够明显抑制hMSCs成骨分化相关基因Runx2、Osterix、OPG、OPN的mRNA表达(P<0.05).通过Western blot,加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d和14 d后均能够明显抑制hMSCs的Runx2蛋白和SMYD2蛋白的表达.结论 抑制SMYD2的表达能够抑制成骨相关基因的表达,说明SMYD2在成骨分化过程中起到促进成骨的作用.

SMYD2;LLY-507;MC3T3-E1;hMSCs;成骨分化

李建良;张濛;麦嘉乐;何琪;张罡瑜;陈伟坚;肖嘉聪;潘兆丰;宫大伟;王海彬

广州中医药大学,广东 广州510405;广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科实验室,广东 广州510405;河南省人民医院,郑州大学人民医院,河南大学人民医院骨科,河南 郑州450003;山东省文登整骨医院,山东 威海264400;广州中医药大学第一附属医院,广东 广州510405

中国骨质疏松杂志

[1]李建良;张濛;麦嘉乐;何琪;张罡瑜;陈伟坚;肖嘉聪;潘兆丰;宫大伟;王海彬-.组蛋白甲基转移酶2(SMYD2)抑制剂LLY-507对成骨分化的影响)[J].中国骨质疏松杂志,2022(03):373-379,433

组蛋白甲基转移酶,SMYD2,LLY,成骨分化,骨细胞,亚克,MC3T3,E1,人骨髓间充质干细胞,hMSCs,CCK,碱性磷酸酶,ALP,活性测定,定检,茜素红,半定量分析,分析检测,矿化,成骨相关基因,Osterix,Runx2,OPG,OPN,blot,细胞活性,抑制细胞增殖,nmol,qPCR,促进成骨

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