目的:研究褪黑素对过氧化氢(H2O2)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:体外培养SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞分为对照组、H2O2组、不同浓度褪黑素组和2-苯基-N-乙酰色胺(Luzindole)组.对照组为正常培养SH-SY5Y细胞,H2O2组加入含有200μmol·L-1 H2O2的培养基,不同浓度褪黑素组加入不同浓度(1、5和10μmol·L-1)褪黑素和含有200μmol·L-1 H2O2的培养基,Luzindole组加入50μmol·L-1 Luzindole、10μmol·L-1褪黑素和含有200μmol·L-1 H2O2的培养基.采用CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针检测各组细胞中活性氧(ROS)水平,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平,荧光显微镜观察各组自噬泡荧光强度.结果:与对照组比较,H2O2组SH-SY5Y细胞存活率降低(P<0.01),ROS水平和细胞凋亡率升高(P<0.01).与H2O2组比较,不同浓度褪黑素组SH-SY5Y细胞存活率升高(P<0.05),ROS水平和细胞凋亡率降低(P<0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P<0.01),10μmol·L-1褪黑素组自噬泡荧光强度升高(P<0.05).与10μmol·L-1褪黑素组比较,1μmol·L-1褪黑素组和Luzindole组SH-SY5Y细胞存活率明显降低(P<0.05);1和5μmol·L-1褪黑素组及Luzindole组SH-SY5Y细胞中ROS水平和细胞凋亡率升高(P<0.05),SH-SY5Y细胞中LC3-Ⅱ表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01);1μmol·L-1褪黑素组和Luzindole组自噬泡荧光强度降低(P<0.05).结论:褪黑素可以抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤,具有神经保护作用,其机制可能与降低ROS水平和提高细胞自噬有关.

神经母细胞瘤细胞;褪黑素;氧化应激;活性氧;自噬

周阳;米旭光;蒲文星;汪文涛;景猛;孟繁凯

长春中医药大学临床医学院,吉林 长春 130117;吉林省人民医院中心实验室,吉林 长春130021;吉林省人民医院神经外科,吉林 长春 130021

吉林大学学报（医学版）

[1]周阳;米旭光;蒲文星;汪文涛;景猛;孟繁凯-.褪黑素对过氧化氢诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧化应激的改善作用及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(02):340-347

Luzindole

褪黑素,SH,SY5Y,H2O2,人神经母细胞瘤细胞,氧化应激损伤,体外培养,苯基,色胺,CCK,细胞存活率,流式细胞术,细胞凋亡率,DCFH,DA,荧光探针,ROS,blotting,微管,轻链,LC3,蛋白表达水平,荧光显微镜观察,荧光强度,有神,神经保护作用,细胞自噬

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