旨在研究牛种布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统(T4SS)对巨噬细胞内质网应激和细胞凋亡的影响,深入探究布鲁氏菌的分子致病机制.本研究以牛种布鲁氏菌疫苗株A19及其T4SS启动子缺失株A19ΔVirB侵染小鼠巨噬细胞,分别在侵染的6、12、24 h收集细胞RNA和总蛋白,通过qRT-PCR以及Western blot检测内质网应激标志性分子(GRP78和CHOP)、凋亡相关分子(BAX和BCL-2)的转录水平和蛋白表达水平;通过流式细胞术检测不同时间点的细胞凋亡情况.结果显示,在侵染的6、12和24 h,缺失株A19ΔVirB组GRP78的转录水平及蛋白表达水平均显著低于亲本株A19组(P＜0.05);在侵染后的6 h,缺失株组CHOP的转录水平及蛋白表达水平也显著低于亲本株(P＜0.05),但到了 24 h,出现了显著高于亲本株(P＜0.05)的现象;在侵染的24 h,缺失株A19ΔVirB组BAX的转录水平及蛋白表达水平显著高于亲本株(P＜0.05);而在侵染的24 h,缺失株组BCL-2的转录水平及蛋白表达水平显著低于亲本株(P＜0.05);流式结果进一步显示,在侵染的24 h,缺失株组的细胞凋亡率显著高于亲本株(P＜0.05);本试验的结果表明,T4SS缺失后,会导致牛种布鲁氏菌引起内质网应激的能力减弱,诱导细胞凋亡的能力增强.本研究为进一步解析布鲁氏菌的致病机制奠定了基础,也为今后布鲁氏菌T4SS的功能研究提供了科研依据.

布鲁氏菌;缺失株;T4SS;内质网应激;细胞凋亡

杨琴;邓肖玉;谢珊珊;易继海;王勇;张倩;王震;陈创夫

石河子大学动物科技学院,石河子832000;人兽共患传染性疾病防治协同创新中心,石河子832000;新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,石河子832000;动物疫病防控兵团重点实验室,石河子832000

畜牧兽医学报

[1]杨琴;邓肖玉;谢珊珊;易继海;王勇;张倩;王震;陈创夫-.牛种布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统对巨噬细胞内质网应激和细胞凋亡的影响)[J].畜牧兽医学报,2022(04):1192-1200

VirB

布鲁氏菌,分泌系统,内质网应激,T4SS,致病机制,疫苗株,A19,启动子,缺失株,侵染,小鼠巨噬细胞,总蛋白,qRT,blot,GRP78,CHOP,BAX,BCL,转录水平,蛋白表达水平,过流,流式细胞术,不同时间点,亲本株,细胞凋亡率,功能研究

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