[目的]通过构建鸭疫里默氏杆菌RIA_0940基因缺失株并测定其生物学特性,探讨RIA_0940基因的潜在功能.[方法]以鸭疫里默氏杆菌RA-GD株为亲本株,扩增其左右同源臂及红霉素抗性基因(ermR)盒片段,构建左同源臂-ermR抗性基因盒-右同源臂融合片段,通过自然转化的方法缺失RA-GD株RIA_0940基因,并利用PCR筛选、鉴定RA-GDΔRIA_0940基因缺失株.分别对亲本株RA-GD和缺失株RA-GDΔRIA_0940的生长特性、对雏鸭的半数致死量、感染鸭血液和组织载菌量及对Vero细胞的黏附和入侵性能进行比较分析.[结果]试验成功构建了 RA-GD株的RIA_0940基因缺失株(RA-GDΔRIA_0940);生物学特性检测结果显示,RA-GDΔRIA_0940株体外生长能力较亲本株低,基因缺失株在生长后期生长受到显著或极显著抑制(P＜0.05;P＜0.01);RA-GDΔRIA_0940株对雏鸭的半数致死量是亲本株的114倍;与亲本株相比,缺失株感染鸭血液和组织的载菌量显著或极显著下降(P＜0.05;P＜0.01);缺失株对Vero细胞的黏附和入侵性能均极显著低于亲本株(P＜0.01).[结论]本试验成功构建RA-GD株RIA_0940基因缺失株,该缺失株在体外培养条件下生长能力较亲本株低,对雏鸭的致病力、感染鸭血液和组织载菌量及对Vero细胞的黏附和入侵性能均显著或极显著低于亲本株.本试验结果为深入研究鸭疫里默氏杆菌的分子致病机理和研制基因工程疫苗奠定了基础.

鸭疫里默氏杆菌;RIA_0940基因;基因缺失;生物学特性;毒力因子

李林林;董嘉文;张俊勤;黄允真;孙敏华

广东省农业科学院动物卫生研究所,农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广州510640

中国畜牧兽医

[1]李林林;董嘉文;张俊勤;黄允真;孙敏华-.鸭疫里默氏杆菌RIA_0940基因缺失株的构建及主要生物学特性测定)[J].中国畜牧兽医,2022(12):4564-4572

ermR

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