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典型文献
GST-pull Down和免疫共沉淀联合质谱鉴定埃及伊蚊中肠的Cry4Ba和Cry11Aa互作蛋白
文献摘要:
晶体蛋白(crystal protein,Cry)毒素是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)分泌的主要杀虫蛋白,其中Cry4Ba和Cry11Aa对埃及伊蚊(Aedes aegypti)幼虫具有特异的毒杀活性.Cry毒素作用于昆虫肠道上皮细胞需要细胞膜受体的介导,而昆虫肠道的免疫应答因子通过识别Cry毒素,进而驱动免疫系统抵御毒素的侵染.为了系统探究Cry4Ba和Cry11Aa毒素与埃及伊蚊的分子互作机制,本研究通过制备GST-Cry4Ba和GST-Cry11Aa融合蛋白,提取Cry4Ba和Cry11Aa晶体蛋白,利用GST-pull down和免疫共沉淀技术挖掘埃及伊蚊中肠刷状缘膜泡囊蛋白中与Cry4Ba和Cry11Aa互作的结合蛋白.通过液相色谱串联质谱鉴定和数据库比对,发现133个与Cry4Ba互作蛋白和237个与Cry11Aa互作蛋白.通过生物信息学分析,从中筛选到16个膜结合或跨膜蛋白,包括5个氨肽酶N、1个碱性磷酸酶、1个钙黏蛋白、2个α-淀粉酶、1个B型清道夫受体、2个电压依赖性阴离子通道以及4个肌动蛋白.此外,筛选到7个与免疫或维持细胞稳态相关蛋白,包括1个肽聚糖识别蛋白、1个载脂蛋白、1个血粘蛋白、1个丝氨酸蛋白酶抑制剂以及3个热激蛋白.本研究为后续埃及伊蚊Bt受体的功能验证以及免疫应答机制的研究提供必要的靶标参考.
文献关键词:
苏云金芽胞杆菌;埃及伊蚊;GST-pull down;免疫共沉淀;Cry互作蛋白
作者姓名:
王焌翔;杨小祯;何欢;张灵玲;关雄
作者机构:
福建农林大学植物保护学院/生物农药与化学生物学教育部重点实验室/海峡两岸特色作物安全生产省部共建协同创新中心,福州350002
引用格式:
[1]王焌翔;杨小祯;何欢;张灵玲;关雄-.GST-pull Down和免疫共沉淀联合质谱鉴定埃及伊蚊中肠的Cry4Ba和Cry11Aa互作蛋白)[J].农业生物技术学报,2022(09):1797-1809
A类:
Cry4Ba,Cry11Aa
B类:
GST,pull,Down,免疫共沉淀,质谱鉴定,埃及伊蚊,中肠,互作蛋白,晶体蛋白,crystal,protein,苏云金芽胞杆菌,Bacillus,thuringiensis,Bt,杀虫蛋白,Aedes,aegypti,幼虫,毒杀活性,昆虫肠道,肠道上皮细胞,细胞膜,膜受体,免疫应答,免疫系统,侵染,系统探究,分子互作,互作机制,融合蛋白,down,结合蛋白,液相色谱串联质谱,库比,生物信息学分析,跨膜蛋白,氨肽酶,碱性磷酸酶,钙黏蛋白,淀粉酶,清道夫受体,电压依赖性阴离子通道,肌动蛋白,细胞稳态,肽聚糖识别蛋白,载脂蛋白,粘蛋白,丝氨酸蛋白酶抑制剂,热激蛋白,功能验证,应答机制,靶标
AB值:
0.291584
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