目的 探讨JSH-23联合Stattic靶向抑制核因子-κB(NF-κB)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)双信号转导通路对间质型胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移能力以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白表达的影响.方法 自肿瘤基因组学图谱计划官网下载529例胶质瘤患者转录组测序结果,生物信息学分析RelA/P65和STAT3与间质型胶质母细胞瘤标志物的相关性,以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白在间质型、经典型和前神经型胶质母细胞瘤中的表达.体外培养的人胶质瘤细胞系U87MG和U251MG分别经JSH-23、Stattic、JSH-23和Stattic联合处理,细胞毒性实验计算两种药物的半数抑制浓度(IC50),药物协同实验评估两种药物的协同作用;CCK-8法和平板克隆实验检测肿瘤细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测肿瘤细胞迁移能力,Western blotting法检测NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白P65、磷酸化P65(p-P65)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)以及CD44的相对表达量.结果 (1)生物信息学分析显示,RelA/P65 mRNA和STAT3 mRNA与间质型胶质母细胞瘤标志物CD44、CXCR4、CHI3L1、IL-4R、TRADD呈正相关(r=0.206～0.605,均P＜0.01),且间质型胶质母细胞瘤NF-KB通路和STAT3通路相关蛋白表达水平最高、经典型其次、前神经型最低.(2)细胞毒性实验显示,JSH-23对 U87MG 和 U251MG 细胞的 IC50为 59.39 和 56.21 μmol/L,Stattic 为 0.96 和 1.08 μmol/L.药物协同实验显示,JSH-23为40～80 μmol/L以及Stattic为0.50～1 μmol/L时对U87MG细胞的协同效应最高,JSH-23为40 μmol/L以及Stattic为1 μmol/L时对U251MG细胞的协同效应最高,并且最终确定JSH-23的终浓度为 60 μmol/L,Stattic 为 1 μmol/L.(3)经 JSH-23、Stattic、JSH-23 和 Stattic 联合处理后,U87MG 和 U251MG细胞增殖活性降低(均P=0.000),集落形成率减少(均P=0.000),细胞迁移率降低(均P＜0.05),结晶紫染色阳性细胞数目减少(均P=0.000),以及P65(均P=0.000)、p-P65(均P=0.000)、STAT3(均P=0.000)、p-STAT3(均P=0.000)和CD44(均P=0.000)相对表达量降低,尤以JSH-23和Stattic联合处理后降低最显著(均P＜0.01).结论 JSH-23联合Stattic靶向抑制NF-κB和STAT3双通路可以有效抑制间质型胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移能力,并下调NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白的表达.

胶质母细胞瘤;NF-κB;STAT3转录因子;细胞增殖;细胞运动;肿瘤细胞;培养的

任枭;李佳博;王旭亚;张锦浩;张一鸣;范吉康;易立;张辰;于圣平;杨学军

300052 天津医科大学总医院神经外科;430022 武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科

中国现代神经疾病杂志

[1]任枭;李佳博;王旭亚;张锦浩;张一鸣;范吉康;易立;张辰;于圣平;杨学军-.JSH-23联合Stattic靶向NF-κB和STAT3双信号转导通路抑制胶质瘤细胞增殖和迁移实验研究)[J].中国现代神经疾病杂志,2022(05):393-403

JSH

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