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典型文献
miR-34a-5p靶向BCAN对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响
文献摘要:
目的 探究MicroRNA-34a-5p(miR-34a-5p)过表达对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其与短蛋白聚糖(BCAN)的靶向关系.方法 收集36例脑胶质瘤患者的脑胶质瘤组织和因脑外伤行内减压术的36例患者的正常脑组织.体外培养人胶质瘤细胞U373、U251 MG、LN229、A172和人正常星形胶质细胞NHA,逆转录定量PCR(RT-qPCR)检测组织/细胞中miR-34a-5p、BCAN mRNA表达水平.取对数生长期的U251 MG细胞,分为对照组(NC组)、mimic-NC组(转染miR-34a-5p mimic阴性对照)、miR-34a-5p过表达组(转染 miR-34a-5p mimic)、miR-34a-5p 过表达+pcDNA3.1-NC 组(miR-34a-5p mimic 和 pcDNA3.1-BCAN 阴性对照空载体质粒共转染)、miR-34a-5p 过表达+pcDNA3.1-BCAN 组(miR-383-5p mimic 和 pcDNA3.1-BCAN 共转染).转染48h后,收集各组细胞用RT-qPCR检测转染效率.MTT法检测细胞增殖活性;划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western Blot检测细胞中BCAN、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测进一步验证miR-34a-5p与BCAN的靶向关系.结果 胶质瘤组织中BCAN mRNA表达水平显著高于正常组织,而miR-34a-5p的表达水平显著低于正常组织,差异有统计学意义(均P<0.05);与人正常星形胶质细胞NHA相比,BCAN在人胶质瘤细胞中的表达显著升高(P<0.05),而miR-34a-5p呈低表达(P<0.05).转染后,与NC组相比,miR-34a-5p过表达组细胞中miR-34a-5p水平显著升高(P<0.05),BCAN mRNA和蛋白水平、细胞增殖率、划痕愈合率、穿膜细胞数以及Cyclin D1、PCNA、MMP-2、MMP-9的表达均显著降低(均P<0.05);在过表达miR-34a-5p的基础上,上调BCAN的表达可显著减弱miR-34a-5p过表达对U251 MG细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(均P<0.05).双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-34a-5p的高表达可显著抑制BCAN-WT的荧光素酶活性(P<0.05).结论 miR-34a-5p是BCAN的上游调控因子,过表达miR-34a-5p可靶向下调BCAN的表达,进而抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移侵袭.
文献关键词:
胶质瘤;短蛋白聚糖;MicroRNA-34a-5p;增殖;迁移;侵袭
作者姓名:
李华晓;麦浩坚;宋同均;王士强;黎志迪;陈小凤
作者机构:
518104深圳,深圳市中西医结合医院脑外科
引用格式:
[1]李华晓;麦浩坚;宋同均;王士强;黎志迪;陈小凤-.miR-34a-5p靶向BCAN对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响)[J].临床神经外科杂志,2022(02):148-155
A类:
BCAN,短蛋白聚糖
B类:
miR,34a,5p,胶质瘤细胞,MicroRNA,过表达,迁移及侵袭,脑胶质瘤,脑外伤,减压术,脑组织,体外培养,U373,U251,MG,LN229,A172,星形胶质细胞,NHA,逆转录,qPCR,对数生长期,NC,mimic,+pcDNA3,空载,质粒,共转染,48h,转染效率,MTT,细胞增殖活性,划痕实验,Transwell,小室,实验检测,细胞迁移,侵袭能力,Blot,G1,特异性周期蛋白,D1,Cyclin,增殖细胞核抗原,PCNA,基质金属蛋白酶,MMP,双荧光素酶报告基因,基因检测,正常组织,低于正常,低表达,细胞增殖率,愈合率,膜细胞,迁移和侵袭,WT,荧光素酶活性,调控因子,制胶,细胞的增殖,增殖和迁移,迁移侵袭
AB值:
0.208163
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