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迷迭香酸通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬增强巨噬细胞抗菌免疫的机制研究
文献摘要：
探讨迷迭香酸(rosmarinic acid)通过上调线粒体自噬增强巨噬细胞抗菌免疫的具体分子机制.将巨噬细胞RAW264.7用不同浓度的迷迭香酸预处理后感染金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus,提取细胞总RNA和总蛋白,利用q-PCR和Western blot法分别检测磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)转录水平和蛋白表达的变化;使用线粒体分离试剂盒分离巨噬细胞线粒体,结合Western blot法检测E3泛素-蛋白连接酶Parkin在线粒体的募集情况及其磷酸化水平的变化;综合运用免疫共沉淀和激光共聚焦显微技术观察PINK1和Parkin在细胞内的共定位情况并观察迷迭香酸对PINK1/Parkin相互作用的影响;利用线粒体自噬抑制剂Mdivi-1(mitochondrial division inhibitor 1)预处理、小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲除技术以及细菌平板计数,检测炎症细胞因子水平和胞内杀菌能力,确证迷迭香酸可以通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬增强巨噬细胞抗菌免疫.结果显示,迷迭香酸可显著上调PINK1转录和蛋白水平的表达,促进Parkin由细胞质向线粒体募集并增强其磷酸化水平,促进PINK1和Parkin的相互作用并增强其在巨噬细胞内的共定位;阻断线粒体自噬或敲除PINK1能显著抑制迷迭香酸对巨噬细胞抗菌免疫的促进作用.该研究表明,迷迭香酸通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬促进巨噬细胞抗菌固有免疫应答.
文献关键词：
迷迭香酸;PINK1/Parkin;线粒体自噬;巨噬细胞;抗菌免疫
中图分类号：
作者姓名：
程成;沙舟;陈想;张薇;史丽云
作者机构：
南京中医药大学,江苏南京 210023
文献出处：
引用格式：
[1]程成;沙舟;陈想;张薇;史丽云-.迷迭香酸通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬增强巨噬细胞抗菌免疫的机制研究)[J].中国中药杂志,2022(23):6450-6456
A类：
激光共聚焦显微技术
B类：
迷迭香酸,PINK1,Parkin,线粒体自噬,巨噬细胞,抗菌免疫,rosmarinic,acid,RAW264,酸预处理,金黄色葡萄球菌,Staphylococcus,aureus,总蛋白,blot,磷酸酶及张力蛋白同源物,PTEN,induced,putative,kinase,转录水平,试剂盒,E3,泛素,连接酶,募集,磷酸化,免疫共沉淀,技术观,共定位,自噬抑制剂,Mdivi,mitochondrial,division,inhibitor,小干扰,small,interfering,siRNA,敲除,平板计数,炎症细胞因子,细胞因子水平,杀菌,确证,细胞质,断线,固有免疫应答
AB值：
0.266883
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