该文探究开心散加减方(MKXS)通过调节神经炎症反应改善早老素1/2条件性双基因敲除(PS cDKO)阿尔茨海默病(AD)模型小鼠记忆障碍和突触损伤的作用机制.将60只3～3.5月龄PS cDKO小鼠及同窝野生型(WT)对照小鼠,随机分为3组:野生型(WT)组、模型(PS cDKO)组、模型+开心散加减方(PS cDKO+MKXS)组,每组20只.野生型组和模型组小鼠给予普通饲料喂养,模型+开心散加减方组小鼠给予含MKXS(给药剂量为2.55 g·kg-1)的饲料喂养60 d.新异物体测试检测小鼠识别记忆;蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠海马(HPC)中磷酸化Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ α(p-αCaMK Ⅱ)、N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR)各亚单位(NR1、NR2A、NR2B)、tau蛋白(tau)的蛋白表达情况;免疫组织化学染色观察HPC CA1区小胶质细胞形态;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测小鼠HPC中环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、NR1、NR2A、NR2B、突触后致密蛋白 95(PSD95)和微管相关蛋白2(MAP2)的mRNA水平;ELISA检测小鼠HPC中IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白含量;免疫共沉淀(Co-IP)检测Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ α(αCaMK Ⅱ)及p-αCaMK Ⅱ与PSD95蛋白相互作用.结果显示,与模型组小鼠相比,MKXS明显增加小鼠对新物体的偏好指数、识别指数,降低小鼠HPC中p-tau(ser 396/404)的蛋白表达水平和COX-2、iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA 的表达量,增加小鼠 HPC 中 NR1、NR2A、NR2B、p-αCaMK Ⅱ 蛋白和 PSD95、NR1、NR2A、NR2B、MAP2 mRNA 的表达量,并且MKXS增强了小鼠HPC中PSD95与αCaMK Ⅱ、PSD95与p-αCaMK Ⅱ蛋白相互作用.免疫组织化学染色结果显示,MKXS抑制小胶质细胞激活.综上所述,MKXS对阿尔茨海默病模型小鼠记忆障碍改善作用可能通过抑制神经炎症反应调节αCaMKⅡ与PSD95蛋白结合,进而恢复突触功能受损而实现.

开心散加减方;阿尔茨海默病;记忆障碍;突触损伤;神经炎症;PS cDKO小鼠

卢志园;赵晨怡;杨光;童雨婷;巴宗韬;热爱拉·阿合力江;杨建梅;徐颖

上海中医药大学生理教研室,上海201203;上海市徐汇区中心医院中医科,上海200031

中国中药杂志

[1]卢志园;赵晨怡;杨光;童雨婷;巴宗韬;热爱拉·阿合力江;杨建梅;徐颖-.开心散加减方通过抑制神经炎症调控αCaMKⅡ-PSD95蛋白结合改善阿尔茨海默病模型小鼠记忆障碍的机制研究)[J].中国中药杂志,2022(22):6217-6226

开心散加减方,MKXS,cDKO,cDKO+MKXS

炎症调控,CaMK,PSD95,蛋白结合,阿尔茨海默病模型,模型小鼠,记忆障碍,神经炎症反应,条件性,双基因敲除,AD,突触损伤,月龄,野生型,WT,喂养,给药剂量,新异,异物,体测,别记,蛋白印迹法,blot,小鼠海马,HPC,磷酸化,Ca2+,依赖性蛋白激酶,NMDAR,亚单位,NR1,NR2A,NR2B,tau,免疫组织化学染色,CA1,小胶质细胞,细胞形态,qRT,中环,环氧合酶,COX,诱导型一氧化氮合酶,iNOS,微管,MAP2,蛋白含量,免疫共沉淀,Co,蛋白相互作用,ser,蛋白表达水平,染色结果,胶质细胞激活,综上所述,突触功能

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