典型文献
半夏凝集素蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA的建立
文献摘要：
为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin,PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了 PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL-1,检测抗体稀释倍数为1∶450,包被条件为4℃过夜,封闭时间、抗原及检测抗体孵育时间均为90 min,辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(streptavidin-horseradish peroxidase,SA-HRP)孵育时间为15 min.该方法对PTL抗原的定量限为0.375 ng·mL-1;线性范围为75.000～4 800.000 pg·mL-1,R2=0.997 1;加样回收率在90.0％～110.0％;试验内和试验间精密性变异系数分别在2.0％～3.0％、2.0％～8.5％.采用该方法测定3批半夏及其炮制品中PTL含量,测得半夏中PTL质量分数均值为35.42 mg·g-1,其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL质量分数均值分别为1.15 mg·g-1、16.53 μg·g-1和122.63 ng·g-1,表明炮制后PTL含量显著下降.该文建立的PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法线性较好,反应灵敏,准确度高,为半夏炮制过程中PTL含量检测提供一种简便有效的监测方法.
文献关键词：
半夏;凝集素蛋白;单克隆抗体;双抗夹心ELISA
中图分类号：
作者姓名：
谢雨薇;郁红礼;吴皓;陶兴宝;王贺鹏;程砚秋;王彩霞;曾平;刘冰冰;张萍;崔小兵
作者机构：
南京中医药大学药学院,江苏南京210023;江苏省中药炮制重点实验室,江苏南京210023;国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心,江苏南京210023;中国食品药品检定研究院,北京100050
文献出处：
引用格式：
[1]谢雨薇;郁红礼;吴皓;陶兴宝;王贺鹏;程砚秋;王彩霞;曾平;刘冰冰;张萍;崔小兵-.半夏凝集素蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA的建立)[J].中国中药杂志,2022(22):6076-6081
A类：
B类：
半夏凝集素,凝集素蛋白,单克隆抗体的制备,双抗,夹心,炮制品,内源性,Pinellia,ternata,lectin,PTL,杂交瘤细胞,原定,检测条件,捕获抗体,检测抗体,倍数,包被,过夜,孵育时间,辣根过氧化物酶,streptavidin,horseradish,peroxidase,HRP,定量限,线性范围,pg,精密性,法半夏,姜半夏,法线,炮制过程,含量检测,监测方法
AB值：
0.306111
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