典型文献
利用实验设计优化和建立抗CD38单克隆抗体ADCP生物学活性测定方法
文献摘要：
利用实验设计(design of experiment,DoE)方法建立抗CD38单抗(monoclonal antibody,mAb)的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)生物学活性检测方法.以 Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞,Daudi细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(BrightGloTM Lucifer-ase Assay system)检测抗CD38单抗的ADCP生物学活性,并运用DoE方法进行实验参数优化.结果显示,抗CD38单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)B]+D,方法经统计学实验设计对多个实验参数进行筛选和优化,确定抗体工作浓度为800～20.81 ng·mL-1,靶细胞和效应细胞的接种量分别为每孔7.5×104和2.5×104个,诱导时间为6 h.该方法具有良好的专属性;5个不同组回收率样本经3次检测,相对效价分别为(59.97±4.74)％、(82.44±5.15)％、(110.69±11.71)％、(129.23±5.22)％和(162.15±3.66)％;回 收率在 103％～120％,RSD均小于11％,线性检测范围为50％～150％.本研究利用DoE设计成功筛选、优化和建立基于报告基因的抗CD38单抗ADCP生物学活性测定方法,该方法具有良好的专属性、重复性和准确性,可作为抗CD38单抗ADCP生物学活性的评价方法.
文献关键词：
抗CD38单抗;抗体依赖性细胞吞噬作用;生物学活性;实验设计;Plackett-Burman设计;优化;验证
中图分类号：
作者姓名：
刘春雨;于传飞;李欣;付志浩;崔永霏;郭璐韵;王兰
作者机构：
中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室,国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室/国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,北京102629;广州市药品检验所,广州510160
文献出处：
引用格式：
[1]刘春雨;于传飞;李欣;付志浩;崔永霏;郭璐韵;王兰-.利用实验设计优化和建立抗CD38单克隆抗体ADCP生物学活性测定方法)[J].药学学报,2022(05):1459-1464
A类：
抗体依赖性细胞吞噬作用,CD32a,BrightGloTM,Lucifer
B类：
实验设计优化,CD38,单克隆抗体,ADCP,生物学活性测定,测定方法,design,experiment,DoE,单抗,monoclonal,antibody,mAb,dependent,cell,mediated,phagocytosis,活性检测,Jurkat,NFAT,Fc,RI,转基因细胞,细胞系,效应细胞,Daudi,靶细胞,荧光素酶,ase,Assay,system,量效关系,四参数,参数方程,1+,+D,法经,接种量,诱导时间,专属性,效价,RSD,线性检测,检测范围,研究利用,计成,报告基因,Plackett,Burman
AB值：
0.383044
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