典型文献
线粒体钙离子单向转运体对脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响
文献摘要：
目的 研究线粒体钙离子单向转运体(MCU)对脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响,探讨MCU作为治疗胶质瘤新靶点的可能性.方法 Western印迹法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤干细胞(T456,T4121,T387和T3832)和胶质瘤细胞(U87和U251)中MCU蛋白和mRNA表达水平.构建短发夹RNA干涉阴性对照(shNT)、shMCU#1和shMCU#2质粒,利用磷酸钙转染法包装病毒,转染上述4种胶质瘤干细胞,分别获得该4种细胞的shNT、shMCU#1和shMCU#2细胞,并用RT-qPCR检测MCU敲低效果.将上述转染的细胞接种到96孔板中,于培养第0,2,4和6天用CellTiter-Glo?Luminescent细胞活力检测试剂盒检测细胞活力;第6天用成像显微镜观察每孔形成肿瘤球的大小并计数.用MCU抑制剂DS1657051125和50μmol·L-1处理脑胶质瘤干细胞(T456和T4121)、人神经干细胞(16157)和人星形胶质细胞(NHA),同时设溶剂对照(0.1％DMSO)组,于培养第0,2,4和6天检测细胞活力,第6天观察形成肿瘤球的大小和细胞状态.构建LUC-shNT,LUC-shMCU#1和LUC-shMCU#2质粒,磷酸钙转染法包装病毒,并转染T387和T4121细胞,随后将转染的细胞注射到BALB/c裸小鼠颅内,25 d后用IVIS活体成像系统对小鼠脑内形成移植瘤体积进行生物发光检测,并记录小鼠存活时间.结果 除T456细胞,4121,T387和T3832细胞MCU mRNA和蛋白表达水平均高于胶质瘤细胞U87和U251.与各自shNT对照组相比,4种脑胶质瘤干细胞shMCU#1和shMCU#2组MCU蛋白表达均显著下降(P<0.01),细胞活力亦明显降低(P<0.01),肿瘤球大小和数量显著减少(P<0.01).与细胞对照组相比,DS1657051125μmol·L-1可显著抑制T387,T4121和16157细胞活力(P<0.01),但对NHA细胞活力抑制作用相对较弱(P<0.05);DS1657051150μmol·L-1可抑制T387,T4121,16157和NHA细胞活力(P<0.01).小鼠活体成像检测显示,与接种LUC-shNT细胞组相比,接种敲低MCU的T387和T4121细胞小鼠颅内移植瘤区域发光显著减弱,移植瘤小鼠平均存活时间亦明显延长.结论 敲低MCU可抑制脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新能力,并延长颅内移植胶质瘤小鼠的存活时间.
文献关键词：
线粒体钙离子单向转运体;神经胶质瘤;脑胶质瘤干细胞;细胞增殖
中图分类号：
作者姓名：
李琳;陈佳意;韩秋影;李爱玲;满江红;潘欣
作者机构：
国家生物医学分析中心,北京 100850
文献出处：
引用格式：
[1]李琳;陈佳意;韩秋影;李爱玲;满江红;潘欣-.线粒体钙离子单向转运体对脑胶质瘤干细胞增殖和自我更新的影响)[J].中国药理学与毒理学杂志,2022(09):665-672
A类：
T4121,T387,T3832,shNT,shMCU#1,shMCU#2,DS1657051125,DS1657051150
B类：
线粒体钙离子单向转运体,脑胶质瘤干细胞,干细胞增殖,自我更新,新靶点,qPCR,T456,胶质瘤细胞,U87,U251,短发,发夹,质粒,磷酸钙,转染,装病,染上,得该,敲低,孔板,CellTiter,Glo,Luminescent,细胞活力,检测试剂盒,孔形,人神,神经干细胞,人星形胶质细胞,NHA,DMSO,细胞状,LUC,细胞注射,射到,BALB,裸小鼠,颅内,IVIS,活体成像系统,移植瘤,瘤体,生物发光,存活时间,蛋白表达水平,可抑制,成像检测,植胶,神经胶质瘤
AB值：
0.181122
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