目的 观察芪灵扶正清解方对抑郁模型大鼠行为学及海马神经元微结构的影响,探讨其对自噬相关蛋白、基因的调节及其抗抑郁机制.方法 30只SD大鼠随机分3组:正常组、模型组、芪灵组.正常组不干预,其余2组以慢性不可预知温和应激联合孤养建立抑郁大鼠模型.各组大鼠进行糖水消耗实验、敞箱实验行为学观察;HE染色观察海马细胞形态;透射电镜观察海马细胞超微结构及自噬变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PC R)检测Ulk1、Beclin1、P62、LC 3蛋白和mRNA的表达;免疫组织化学染色法(IHC)检测海马组织Beclin1表达.结果 行为学实验提示:与正常组比较,模型组大鼠糖水消耗量明显降低(P＜0.05);直立次数、水平穿越的格数和理毛时间减少,粪便粒数和中央格停留时间增加(P＜0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠糖水消耗量明显增加(P＜0.05);直立次数、水平穿越的格数和理毛时间增加,粪便粒数和中央格停留时间减少(P＜0.05).HE染色提示:与正常组比较,模型组海马CA3区细胞数量减少,排列紊乱,部分细胞核模糊;CA1区细胞形态不规则,数量稀疏,体积明显变大,排列紊乱,细胞核模糊;与模型组比较,芪灵组海马CA1区、CA3区细胞形态相对规则,细胞数量相对较多,排列相对齐整,细胞体积相对正常,细胞核较清晰.透射电镜显示:与正常组比较,模型组大鼠海马区神经细胞形态不规则,线粒体结构损伤严重,细胞自噬的表征数量较为丰富;与模型组比较,芪灵组神经细胞形态相对规则,线粒体损伤相对轻微,细胞自噬的表征数量较少.Western blot与qPCR实验提示:与正常组比较,模型组大鼠的Ulk1、Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白和mRNA的表达增加(P＜0.05),P62蛋白和mRNA的表达减少(P＜0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠的Ulk 1、Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白和mRNA的表达减少(P＜0.05),P62蛋白和mRNA的表达增加(P＜0.05).IHC实验提示:与正常组比较,模型组大鼠海马CA3区Beclin1表达增加(P＜0.05);与模型组比较,芪灵组大鼠CA3区Beclin1表达减少(P＜0.05).结论 CUMS联合孤养诱导的抑郁模型大鼠海马神经元CA1区、CA3区首先出现损伤性改变,CA3区可能首先出现自噬异常激活;芪灵扶正清解方能改善抑郁模型大鼠的行为学指标,对其海马神经细胞具有一定的神经保护作用,其抗抑郁机制可能与调节海马细胞异常自噬有关.

芪灵扶正清解方;抑郁模型大鼠;细胞自噬;CUMS;海马

卓桂锋;沈双宏;陈丽丽;王奕锦;廖燃;徐峰圣;杜建

福建中医药大学中西医结合学院 福州 350122

世界科学技术-中医药现代化

[1]卓桂锋;沈双宏;陈丽丽;王奕锦;廖燃;徐峰圣;杜建-.基于自噬探讨芪灵扶正清解方抗抑郁作用研究)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(03):1211-1222

芪灵扶正清解方,Ulk

抗抑郁作用,抑郁模型大鼠,海马神经元,自噬相关蛋白,慢性不可预知温和应激,孤养,抑郁大鼠,大鼠模型,糖水,为学观,HE,海马细胞,细胞形态,透射电镜,电镜观察,细胞超微结构,蛋白免疫印迹法,blot,实时荧光定量聚合酶链式反应,Real,Ulk1,Beclin1,P62,免疫组织化学染色法,IHC,测海,海马组织,行为学实验,消耗量,直立,粪便,粒数,停留时间,CA3,细胞数量,细胞核,CA1,对齐,齐整,细胞体,大鼠海马区,线粒体结构,结构损伤,细胞自噬,线粒体损伤,qPCR,LC3,CUMS,海马神经细胞,神经保护作用

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