目的 探讨miR-519a-3p对肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制.方法 培养正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H2170和PNCI-H1975,RT-qPCR检测细胞中miR-519a-3p和多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)mRNA表达水平,Western Blot法检测GALNT4蛋白表达水平.以NCI-H1299细胞为研究对象,分别构建高表达miR-519a-3p或低表达GALNT4的NCI-H1299细胞,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-519a-3p与GALNT4调控关系.结果 肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H2170和PNCI-H1975中miR-519a-3p的表达显著低于肺上皮细胞BEAS-2B(P<0.05),而GALNT4 mRNA和蛋白的表达显著高于BEAS-2B细胞(P<0.05).高表达miR-519a-3p或低表达GALNT4降低了NCI-H1299细胞迁移和侵袭数及MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05),而提高了细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达(P<0.05).miR-519a-3p靶向负调控GALNT4表达.高表达miR-519a-3p后,NCI-H1299细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.05).与仅高表达miR-519a-3的NCI-H1299比较,同时高表达miR-519a-3p和GALNT4的NCI-H1299细胞迁移和侵袭数及MMP-2、MMP-9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达升高(P<0.05),而凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05).结论 miR-519a-3p在肺癌细胞系中呈低表达,高表达miR-519a-3p可能通过靶向抑制GALNT4表达及PI3K/AKT信号通路的激活减弱肺癌细胞的迁移和侵袭性,并诱导细胞凋亡.

肺癌;miR-519a-3p;GALNT4;细胞迁移;侵袭;凋亡

梁青松;贾军;胡欣

637000 四川省南充市中心医院胸心外科;637000 四川省南充市中心医院呼吸内科;637000 四川省南充市中心医院肿瘤科

河北医药

[1]梁青松;贾军;胡欣-.miR-519a-3p通过靶向GALNT4基因调控肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的分子机制)[J].河北医药,2022(14):2090-2095

519a,GALNT4,PNCI

miR,3p,基因调控,肺癌细胞,癌细胞迁移,养正,肺上皮细胞,BEAS,2B,细胞系,H1299,H2170,H1975,qPCR,多肽,氨基半乳糖,转移酶,Blot,蛋白表达水平,低表达,Transwell,细胞迁移和侵袭,流式细胞仪,基质金属蛋白酶,MMP,半胱天冬酶,Cleaved,caspase,磷酸化,化磷,磷脂,肌醇,PI3K,蛋白激酶,AKT,双荧光素酶报告基因实验,细胞凋亡率,负调控,靶向抑制,侵袭性

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