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含Sushi重复蛋白X连锁2基因敲除对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响
文献摘要:
目的 探讨含Sushi重复蛋白X连锁2(SRPX2)基因敲除对肺腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549 细胞生物学特性的影响.方法 根据是否敲除SRPX2基因将对数生长期的A549 细胞分为对照组和敲除组,敲除组细胞采用成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白9 基因编辑技术敲除SRPX2 基因,对照组细胞常规传代培养.采用聚合酶链式反应法、琼脂糖凝胶电泳以及DNA测序验证是否成功敲除SRPX2 基因.采用流式细胞术检测2组细胞周期,细胞计数试剂盒法检测2组细胞增殖情况,Transwell小室实验检测2组细胞迁移能力.结果 琼脂糖凝胶电泳及DNA测序结果均显示敲除组细胞成功敲除68 bp SRPX2基因部分序列.培养24 h时,敲除组G0/G1 及S期细胞所占比例显著低于对照组,G2/M期细胞所占比例显著高于对照组(P<0.05);培养48 h时,敲除组S期细胞所占比例显著低于对照组,G2/M期细胞所占比例显著高于对照组(P<0.05);培养48 h时,2组G0/G1 期细胞所占比例比较差异无统计学意义(P>0.05).培养0、24、48、72、96 h时,对照组和敲除组细胞的增殖能力随时间的延长均呈升高趋势(F=244.463、87.198,P<0.05);培养0、24、48、72、96 h 时,2 组细胞的增殖能力比较差异均无统计学意义(P>0.05).培养24 h时,对照组和敲除组迁移细胞数分别为(24.200±3.899)、(6.800±1.304)个;培养48 h时,对照组和敲除组迁移细胞数分别为(92.200±6.419)、(48.800±2.280)个;培养24、48 h时,敲除组迁移细胞数显著少于对照组(t=9.464、14.247,P<0.05).结论 敲除肺腺癌A549细胞中SRPX2基因能显著抑制细胞的迁移、阻滞细胞周期,SRPX2基因可能成为肺腺癌治疗的新靶点.
文献关键词:
含Sushi重复蛋白X连锁2;基因敲除;肺腺癌;A549细胞;生物学特性
中图分类号:
作者姓名:
赵隽;温松;于法明;姜东亮;李慎柯
作者机构:
新乡医学院,河南 新乡 453003;濮阳市油田总医院呼吸科,河南 濮阳 457001
文献出处:
引用格式:
[1]赵隽;温松;于法明;姜东亮;李慎柯-.含Sushi重复蛋白X连锁2基因敲除对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响)[J].新乡医学院学报,2022(10):901-906
A类:
B类:
Sushi,连锁,基因敲除,肺腺癌,A549,细胞生物学,生物学特性,SRPX2,肺泡,上皮细胞,对数生长期,成簇规律间隔短回文重复序列,CRISPR,基因编辑技术,传代培养,聚合酶链式反应法,琼脂糖凝胶电泳,流式细胞术,细胞周期,试剂盒法,Transwell,小室,实验检测,细胞迁移能力,bp,G0,G1,G2,细胞的增殖,新靶点
AB值:
0.200631
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