背景:目前关于髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor,MYDGF)与动脉粥样硬化及代谢性疾病的研究较少,因此建立一种载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)敲除骨髓MYDGF缺失的小鼠模型对于研究MYDGF与动脉粥样硬化疾病的关系尤为重要.目的:建立ApoE敲除骨髓MYDGF特异性缺失小鼠模型并进行鉴定.方法:ApoE敲除小鼠和骨髓特异性MYDGF敲除小鼠,均购于上海南方模式生物科技股份有限公司.选取5只ApoE敲除小鼠与10只骨髓特异性MYDGF敲除小鼠进行交配,得到基因型为MYDGFflox/+ApoEflox/+ F1子代小鼠30只,MYDGFflox/+ApoEflox/+互相进行交配,一共得到基因型为MYDGFflox/floxApoEflox/flox/flox双敲除小鼠30只和ApoEflox/flox小鼠子代小鼠34只.采用PCR法进行MYDGFflox及ApoEflox基因型鉴定,记录MYDGFflox/floxApoEflox/flox双敲除小鼠与ApoEflox/flox小鼠2月龄的体长及体质量,采用Western blotting和免疫荧光检测2组小鼠骨髓组织MYDGF蛋白相对表达量,油红O染色检测2组小鼠胸主动脉斑块面积.实验方案经中国人民解放军中部战区总医院动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①得到基因型为ApoEflox/flox小鼠共34只、MYDGFflox/floxApo Eflox/flox小鼠共30只,2组小鼠体长、体质量比较差异均无显著性意义(均P＞ 0.05);⑦MYDGFflox/floxApoEfflox/flox小鼠骨髓组织MYDGF蛋白相对表达量显著低于ApoEflox/flox小鼠(P＜0.05);③MYDG Fflox/floxApoEflox/flox小鼠胸主动脉的斑块面积百分比显著大于ApoEflox/flox小鼠(P＜0.05);④结果证实成功敲除了ApoE小鼠的MYDGF基因,说明成功构建ApoE敲除骨髓特异性MYDGF缺失小鼠模型,并经基因型及蛋白组织水平鉴定;MYDGF基因缺乏可以加重ApoE基因敲除小鼠的动脉粥样硬化.

骨髓细胞;MYDGF基因;ApoE基因;MYDGF蛋白;双基因敲除;小鼠

丁燕;向光大;孟碧莹;徐晓丽;陈月富

湖南医药学院,湖南省怀化市418000;中国人民解放军中部战区总医院,湖北省武汉市430700

中国组织工程研究

[1]丁燕;向光大;孟碧莹;徐晓丽;陈月富-.建立载脂蛋白E基因敲除小鼠骨髓髓源性生长因子缺失模型及鉴定)[J].中国组织工程研究,2022(14):2196-2201

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