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单磷酸脂质A(MPLA)pH敏感脂质体制备及免疫增强作用研究
文献摘要：
目的:制备pH敏感脂质体，避免溶酶体对单磷酸脂质A(monophosphoryl lipid A，MPLA)的降解，提高MPLA的利用率。方法:以DOPE、CHEMS为载体材料，采用薄膜分散法制备pH敏感脂质体。应用动态光散射仪测定脂质体的粒径及Zeta电位，透射电镜观察不同pH值条件下pH敏感脂质体的外观形态，应用流式细胞术评价THP-1、DC2.4细胞对脂质体的吞噬效果，激光共聚焦显微镜下观察脂质体与溶酶体的共定位情况。以乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)为模式抗原，配伍MPLA pH敏感脂质体免疫BALB/c小鼠，ELISA定量检测血清乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)水平，ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞IFN-γ、IL-2斑点形成细胞数(spot forming cells, SFCs)。结果:制备的pH敏感脂质体的平均粒径为(90.90±1.13) nm，多分散指数(polydispersity index, PDI)为0.076±0.013，Zeta电位为(－27.900±0.666) mV，随着溶液的pH值减小粒径明显增大，呈现不规则形态，具备显著的pH敏感性。THP-1细胞吞噬pH敏感荧光脂质体的吞噬率为10.40%，DC2.4细胞的吞噬率为12.40%，吞噬荧光脂质体的吞噬率分别为1.09%和0.28%。激光共聚焦显微镜观察到pH敏感荧光脂质体被THP-1细胞吞噬后，存在于细胞质中，而荧光脂质体存在于溶酶体中，MPLA pH敏感脂质体与MPLA脂质体比较可以显著提高小鼠细胞免疫应答水平，MPLA pH敏感脂质体组的IFN-γ和IL-2 SFCs水平均显著高于MPLA脂质体组(
P<0.01)和无佐剂组(
P<0.001)。
结论:pH敏感脂质体递送系统可以提高MPLA的利用率，使MPLA更好地发挥佐剂作用。
文献关键词：
pH敏感脂质体;单磷酸脂质A;佐剂
中图分类号：
作者姓名：
崔文禹;全文静;李计来;侯一波;徐静;张云涛
作者机构：
国药中生生物技术研究院第三研究室，北京 101111;中国生物技术股份有限公司临床医学中心，北京 100024
文献出处：
引用格式：
[1]崔文禹;全文静;李计来;侯一波;徐静;张云涛-.单磷酸脂质A(MPLA)pH敏感脂质体制备及免疫增强作用研究)[J].中华微生物学和免疫学杂志,2022(09):699-704
A类：
DOPE,CHEMS
B类：
单磷酸,MPLA,脂质体制备,免疫增强,强作用,溶酶体,monophosphoryl,lipid,载体材料,薄膜分散法,动态光散射,Zeta,透射电镜,电镜观察,外观形态,流式细胞术,THP,DC2,激光共聚焦显微镜,显微镜下,共定位,乙型肝炎表面抗原,hepatitis,surface,antigen,HBsAg,模式抗原,配伍,BALB,定量检测,乙型肝炎表面抗体,ELISPOT,小鼠脾淋巴细胞,IFN,斑点,spot,forming,cells,SFCs,平均粒径,多分散,分散指数,polydispersity,PDI,mV,小粒径,细胞吞噬,细胞质,高小,细胞免疫应答,免疫应答水平,佐剂,递送系统
AB值：
0.295326
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