目的 制备猪丹毒丝菌(E.rhusiopathiae,ER)-猪链球菌(Streptococcussuis,SS)二联油乳剂灭活疫苗,并评价其免疫效果.方法 以1株1a型ER(编号AEr31)和1株2型SS(SS2,编号HF2)为制苗菌株,甲醛为灭活剂,ISA201VG矿物油为佐剂,通过两种方式将灭活全菌体(V-AEr31,V-HF2)与佐剂混合[(V-AEr31+V-HF2)+ISA 201VG及(V-AEr31+ISA 201VG)+(V-HF2+ISA 201VG)],制备ER-SS2二联油乳剂灭活疫苗,进行性状、无菌和安全检验.将两种灭活疫苗分别经皮下多点注射免疫小鼠(Ⅰ和Ⅱ组),同时设0.9％氯化钠对照组(Ⅲ组).间接ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体效价和相关细胞因子(IL-4、IL-10、IFNγ、TNF-β、MCP-1)含量,血清杀菌试验检测功能性抗体水平,MTT法测定脾淋巴细胞增殖指数(SI),流式细胞术测定CD4+与CD8+外周血T淋巴细胞亚群百分比;腹腔攻毒试验测定免疫保护率,组织荷菌数法测定攻毒菌株在体内的定植情况,并采集肺、肝、脾、肾脏制作病理组织切片,观察动物脏器病理变化.结果 两种灭活疫苗均符合油乳剂灭活疫苗的性状、无菌、安全检测要求.Ⅰ和Ⅱ组小鼠血清IgG抗体效价、血清功能性抗体水平、相关细胞因子含量、SI及CD4+与CD8+T细胞亚群百分比均显著高于Ⅲ组(P均＜0.05),Ⅰ和Ⅱ组间差异均无统计学意义(P均＞0.05);两种灭活疫苗对小鼠的免疫保护率均为100％,Ⅰ和Ⅱ组小鼠肺、肝、脾、肾脏组织中攻毒菌株定植量显著低于Ⅲ组(P＜0.05),各脏器组织病变较轻.结论 采用两种不同混合方式制备的ER-SS2二联油乳剂灭活疫苗免疫小鼠后均可产生良好的体液免疫和细胞免疫,可100％抵抗ER、SS2和ER-SS2强毒株的攻击.

猪丹毒丝菌;猪链球菌;油乳剂;灭活疫苗;免疫效果;免疫程序

安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036;马鞍山史记动物健康管理有限公司,安徽马鞍山238251;安徽省动物疫病预防与控制中心,安徽合肥230091

[1]韩业芹;崔丽荣;邢刚;何长生;孙裴;刘雪兰;魏建忠;李郁-.猪丹毒丝菌-猪链球菌二联油乳剂灭活疫苗的制备及其免疫效果评价)[J].中国生物制品学杂志,2022(10):1160-1168

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