典型文献
小鼠骨髓来源巨噬细胞培养模型的建立及鉴定
文献摘要:
目的 建立小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)培养模型,并对BMDM进行细胞表面标志物及吞噬能力鉴定.方法 采用32℃培养10 d和37℃培养3 d的方式培养L929细胞,检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)的浓度.获取小鼠骨髓细胞后,分别以M-CSF和两种条件培养的L929细胞上清进行诱导分化,通过光学显微镜对诱导分化后的BMDM进行形态学观察;流式细胞术检测CD11b阳性细胞株所占百分比,免疫荧光法观察诱导后巨噬细胞表面标志抗原CD11b和CD16的表达;对表达绿色荧光蛋白的大肠埃希菌进行吞噬试验鉴定BMDM的吞噬功能.结果 32℃培养10 d的L929细胞上清中M-CSF的浓度显著高于37℃培养3 d(P<0.05).3种诱导方式均可使小鼠骨髓源细胞分化成熟,经32℃培养10 d的L929细胞上清诱导分化后的BMDM生长状态最佳.流式细胞术检测显示巨噬细胞表面标志抗原CD11b阳性率为80.62%,免疫荧光检测显示诱导分化后的BMDM细胞表面有巨噬细胞标志性抗原CD11b和CD16的表达,且具有对表达绿色荧光蛋白的大肠埃希菌良好的吞噬能力.结论 成功制备了小鼠BMDM,并优化了制备和鉴定的条件,为研究免疫细胞功能、病原微生物与巨噬细胞相互作用提供了理想的细胞模型制备方法.
文献关键词:
小鼠骨髓来源巨噬细胞;表面标志物;吞噬能力
中图分类号:
作者姓名:
马玲玲;马红梅;朱源鹤;宋孚洋;史客松;马臣杰;曾瑾
作者机构:
宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川750021;宁夏大学生命科学学院,宁夏银川750021
文献出处:
引用格式:
[1]马玲玲;马红梅;朱源鹤;宋孚洋;史客松;马臣杰;曾瑾-.小鼠骨髓来源巨噬细胞培养模型的建立及鉴定)[J].中国生物制品学杂志,2022(06):706-710,717
A类:
B类:
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AB值:
0.268498
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