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神经细胞炎症模型的构建：小胶质细胞-神经元共培养系统
文献摘要：
目的:通过建立小胶质细胞-神经元共培养系统，制备体外神经细胞炎症模型。方法:选用小鼠BV-2小胶质细胞、NSC34运动神经元、HT-22海马神经元。实验Ⅰ 采用不同浓度LPS(10、100、500和1 000 ng/ml)刺激BV-2小胶质细胞，提取小胶质细胞培养上清液即条件培养基，分别培养两种神经元，采用CCK-8法选取导致神经元活力明显下降50%的LPS浓度用于Transwell共培养系统的建立。实验Ⅱ 将小胶质细胞接种于Transwell上室，神经元种于下室。采用随机数字表法分为2组(
n＝12)：对照组和LPS组，小胶质细胞分别用细胞培养基、LPS培养或孵育6 h，随后更换新鲜培养基继续培养12 h，合并上、下室细胞继续培养。BV-2-NSC34 Transwell共培养系统共培养12 h，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统共培养24 h。采用ELISA法检测神经元培养液IL-1β、IL-18浓度，采用流式细胞术检测神经元凋亡率，采用qRT-PCR检测神经元Bcl-2、Bax的mRNA表达，采用Western blot法检测神经元cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。
结果:实验Ⅰ BV-2-NSC34 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为10 ng/ml，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为1 000 ng/ml。实验Ⅱ 与对照组比较，LPS组神经元培养液IL-1β和IL-18浓度、神经元凋亡率升高，Bax及其mRNA表达上调，Bcl-2及其mRNA表达下调，cleaved caspase-3表达上调(
P<0.05或0.01)。
结论:通过条件培养基技术与Transwell共培养技术成功建立小胶质细胞-神经元共培养系统，为术后认知功能障碍相关神经细胞炎症模型的建立提供实验方案。
文献关键词：
小神经胶质细胞;神经元;共同培养技术;炎症
中图分类号：
作者姓名：
马宝育;张振江;张蕊;刘婕;赵永军
作者机构：
潍坊医学院麻醉学院 山东省医药卫生临床麻醉重点实验室，潍坊 261053;潍坊医学院第一附属医院胸外科，潍坊 261000
文献出处：
引用格式：
[1]马宝育;张振江;张蕊;刘婕;赵永军-.神经细胞炎症模型的构建：小胶质细胞-神经元共培养系统)[J].中华麻醉学杂志,2022(04):416-420
A类：
NSC34
B类：
神经细胞,细胞炎症模型,小胶质细胞,共培养系统,BV,运动神经元,HT,海马神经元,LPS,ml,细胞培养,养上,上清液,条件培养基,CCK,Transwell,孵育,换新,统共,培养液,流式细胞术,神经元凋亡,凋亡率,qRT,Bcl,Bax,blot,cleaved,caspase,术后认知功能障碍,实验方案,小神经胶质细胞,共同培养技术
AB值：
0.171925
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