为探究溶血磷脂酰甘油酰基转移酶(lysophosphatidylglycerol acyltransferase,LPGAT)在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢发育过程中的表达调控特征,本研究首先克隆了中华绒螯蟹Es-lpgat1的开放阅读框序列(登录号MZ312613),进一步采用实时荧光定量PCR(q-PCR)、原位杂交(in situ hybridization,ISH)和RNA干扰分析其在卵巢发育过程中的时空表达模式.结果表明:(1)Es-lpgat1的开放阅读框全长1125 bp,编码374个氨基酸,其蛋白分子量为44 kD,属于LPLAT超级家族,氨基酸序列与三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的LPGAT1相似性最高;(2)qPCR结果表明,Es-lpgat1在中华绒螯蟹卵巢发育期的多种组织中均有表达,其中卵巢中的表达量最高,鳃中表达量最低(P＜0.05);(3)卵巢发育过程中,II期卵巢和肝胰腺中Es-lpgat1表达量最高(P＜0.05),在卵巢Ⅲ～Ⅴ期的发育过程中有显著上升趋势;(4)原位杂交结果显示,在卵巢发育Ⅱ期,Es-lpgat1mRNA定位于卵黄发生前卵母细胞(PRO)和内源性卵黄合成期卵母细胞(EN)的细胞质中,此阶段信号较强;在卵巢发育Ⅳ期,卵巢中Es-lpgat1mRNA信号较弱;在Ⅱ期和Ⅳ期肝胰腺中的Es-lpgat1mRNA均主要定位于成纤维细胞(F)和吸收细胞(R)中;(5)干扰Eslpgat1后,Es-gpat2和Esdgat2的表达水平显著上调;而Es-agpat4和Es-dgat1的表达水平下调.综上所述,Es-lpgat1主要在中华绒螯蟹卵巢和肝胰腺中表达,可能参与卵巢发育期间的磷脂代谢.

中华绒螯蟹;卵巢发育;溶血磷脂酰甘油酰基转移酶;荧光定量PCR;原位杂交;RNA干扰

潘柯伍;王琳;郭勍;吴旭干

上海海洋大学,农业农村部鱼类营养和环境生态研究中心,上海201306;上海海洋大学,农业农村部淡水种质资源重点实验室,上海201306;上海海洋大学,水产科学国家级实验教学示范中心,上海201306

中国水产科学

[1]潘柯伍;王琳;郭勍;吴旭干-.中华绒螯蟹溶血磷脂酰甘油酰基转移酶的基因克隆及其在卵巢发育过程中的表达特征)[J].中国水产科学,2022(01):28-40

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