典型文献
异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用
文献摘要：
为制备抗异育银鲫Carassius auratus gibelio IgM单克隆抗体,以单克隆抗体为工具构建鲫血清中鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)特异性抗体酶联免疫检测技术,运用硫酸铵盐析结合Protein A亲和层析法,从异育银鲫血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM.结果表明:经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,纯化的血清IgM主要有两条蛋白带,相对分子质量分别为82000和25000,分别为异育银鲫IgM的重链和轻链;以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了5株抗异育银鲫IgM单克隆抗体,分别命名为8G1、7C6、8C2、8C5和5C2;抗体分型结果显示,8G1、8C2、8C5和5C2均为IgG1亚型,7C6为IgG2b亚型;免疫印迹分析显示,5株单抗均可特异性识别相对分子质量为25000的IgM轻链分子;间接免疫荧光分析显示,5株单抗均可与异育银鲫脾脏中部分白细胞发生特异性结合,阳性细胞表面呈现绿色点状荧光信号;用鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒粒子包被酶标板,以抗异育银鲫IgM单抗作为检测一抗,碱性磷酸酶标记羊抗鼠Ig作为检测二抗,构建了鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,进一步优化显示,该技术中最佳单抗为8C5,最佳二抗稀释度为1:2000,鲫血清最佳稀释度为1:20.研究表明,本研究中成功制备了抗异育银鲫IgM单克隆抗体,并以此为工具构建了检测鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,研究结果可为今后开展异育银鲫特异性免疫应答研究及CyHV-2疫苗效果评价提供科学参考.
文献关键词：
异育银鲫;免疫球蛋白;单克隆抗体;鲤疱疹病毒Ⅱ型
中图分类号：
作者姓名：
郭宝琴;魏畅;王轶南;李强
作者机构：
盐城工学院 海洋与生物工程学院,江苏 盐城224051;大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连116023
文献出处：
引用格式：
[1]郭宝琴;魏畅;王轶南;李强-.异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用)[J].大连海洋大学学报,2022(03):450-456
A类：
8G1,7C6,8C2,8C5,5C2
B类：
异育银鲫,IgM,单克隆抗体的制备,Carassius,auratus,gibelio,疱疹病毒,CyHV,特异性抗体,抗体酶,酶联免疫检测,免疫检测技术,硫酸铵,铵盐,盐析,Protein,亲和层析,层析法,免疫球蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳分析,白带,相对分子质量,轻链,BALB,杂交瘤技术,技术获得,抗体分型,IgG1,IgG2b,免疫印迹分析,单抗,特异性识别,间接免疫荧光分析,脾脏,特异性结合,阳性细胞,细胞表面,面呈,点状,荧光信号,包被,碱性磷酸酶,抗稀释,特异性免疫,免疫应答
AB值：
0.234053
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