典型文献
巨噬细胞雄激素受体通过调控白细胞介素1β基因表达影响高磷诱发的血管平滑肌细胞钙化
文献摘要:
目的:探讨巨噬细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)是否通过调控白细胞介素(interleukin,
IL)-
1β基因表达影响高磷诱发的血管平滑肌细胞钙化。
方法:采用人单核细胞系THP-1细胞,利用染色质免疫沉淀实验检测AR是否与
IL-1β启动子的雄激素受体元件(androgen receptor element,ARE)序列结合,通过荧光素酶分析实验检测AR是否调控
IL-1β基因表达。基因沉默THP-1细胞的AR,用携带载体或shRNA的慢病毒转染THP-1细胞,流式细胞术分选出带荧光标记的阳性转染细胞THP-1ARsc(对照组)和THP-1ARsi(沉默单核细胞AR),Western印迹法检测THP-1ARsc、THP-1ARsi细胞的AR表达水平,通过佛波酯(50 ng/ml)诱导获得巨噬细胞MФARsc(对照组)或MФARsi(沉默巨噬细胞AR),酶联免疫吸附试验检测MФARsc或MФARsi条件培养基的IL-1β表达水平。用MФARsc或MФARsi的条件培养基加入磷酸盐(磷酸二氢钠,终浓度2.5 mmol/L)后对人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMC)进行培养,茜素红S染色分析HASMC的钙化情况,Western印迹法检测成骨细胞标志物RUNX2和HASMC标志物SM22α的表达水平;中和实验分析IL-1β介导巨噬细胞AR对HASMC钙化的影响。
结果:AR与
IL-1β启动子的ARE序列结合并调控
IL-1β基因表达。与MФARsc细胞比较,MФARsi细胞条件培养基的IL-1β蛋白表达水平显著下降(
P<0.001)。与MФARsc条件培养基比较,MФARsi条件培养基HASMC钙沉积显著减少,RUNX2蛋白表达下降而SM22α蛋白表达增多(均
P<0.05);MФARsi条件培养基+IgG抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制,MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制,而MФARsi条件培养基+IgG抗体组和MФARsi条件培养基+IL-1β抗体组均较MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组HASMC钙化抑制程度更大(均
P<0.05)。
结论:巨噬细胞AR通过与
IL-1β启动子内的ARE序列结合调控IL-1β的表达,IL-1β介导巨噬细胞AR对高磷诱发HASMC钙化的影响。
文献关键词:
受体,雄激素;巨噬细胞;肌细胞,平滑肌;白细胞介素1β;炎症
中图分类号:
作者姓名:
庞海燕;卢志;肖龙飞;陈海燕;尚芝群;蒋宁;王晓娟;魏芳;姜埃利;王林;牛远杰
作者机构:
天津医科大学第二医院肾脏病血液净化科,天津 300211;天津医科大学第二医院泌尿外科,天津 300211;天津医科大学第二医院老年病科,天津 300211
文献出处:
引用格式:
[1]庞海燕;卢志;肖龙飞;陈海燕;尚芝群;蒋宁;王晓娟;魏芳;姜埃利;王林;牛远杰-.巨噬细胞雄激素受体通过调控白细胞介素1β基因表达影响高磷诱发的血管平滑肌细胞钙化)[J].中华肾脏病杂志,2022(05):420-427
A类:
1ARsc,1ARsi,ARsc,ARsi,+IgG
B类:
巨噬细胞,雄激素受体,高磷,血管平滑肌细胞,平滑肌细胞钙化,androgen,receptor,interleukin,人单核细胞,细胞系,THP,染色质免疫沉淀,实验检测,启动子,体元,element,ARE,荧光素酶,基因沉默,shRNA,慢病毒转染,流式细胞术,分选,出带,荧光标记,佛波酯,ml,酶联免疫吸附试验,试验检测,条件培养基,基加,磷酸盐,磷酸二氢钠,人主动脉平滑肌细胞,human,aortic,smooth,muscle,cells,HASMC,茜素红,染色分析,成骨细胞,RUNX2,SM22,蛋白表达水平,+IL,制程
AB值:
0.17767
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