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大鼠胰腺导管干细胞分化形成类胰岛的改良诱导方法
文献摘要：
目的 对大鼠胰腺导管干细胞(rPDSCs)分化形成类胰岛的诱导方法进行改良.方法 在基础培养液DMEM/F12+10％FBS+1％青霉素/1％链霉素中,分别添加2、4、6和8 μmol/L全反式维A酸(ATRA),体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选ATRA最适诱导浓度.以ATRA最适诱导浓度为基础,再分别采用基质胶(matrigel)培养,悬浮培养或悬滴培养方式体外诱导rPDSCs分化形成类胰岛,筛选最适诱导培养方式.采用细胞形态学,双硫腙(DTZ)染色,细胞免疫荧光染色,Real-time PCR和ELISA方法对诱导类胰岛进行检测.结果 与对照组相比,在基础培养液中,添加6 μmol/L ATRA及采用基质胶培养方式诱导效果最好.诱导28 d,细胞富集分化形成胰岛样球形细胞团;DTZ染色呈阳性;在基因和蛋白水平上分别表达胰岛素(insulin)和胰腺十二指肠同源框1(Pdx1);葡萄糖刺激,释放胰岛素和C肽,且具有葡萄糖浓度依赖性.结论 在基质胶培养方式下,采用6 μmol/L ATRA+DMEM/F12+10％FBS+1％青霉素/1％链霉素可以成功诱导rPDSCs体外分化形成类胰岛.
文献关键词：
胰腺导管干细胞;全反式维A酸;胰岛;实时定量聚合酶链反应;大鼠
中图分类号：
作者姓名：
张文琦;杨洁;吴江;郎贯存;效梅
作者机构：
广东海洋大学滨海农业学院动物医学系,广东湛江 524088
文献出处：
引用格式：
[1]张文琦;杨洁;吴江;郎贯存;效梅-.大鼠胰腺导管干细胞分化形成类胰岛的改良诱导方法)[J].解剖学报,2022(03):387-395
A类：
胰腺导管干细胞,rPDSCs,F12+10,FBS+1,DTZ,ATRA+DMEM
B类：
细胞分化,基础培养,培养液,青霉素,链霉素,反式,体外诱导,基质胶,matrigel,悬浮培养,培养方式,诱导培养,细胞形态学,细胞免疫,免疫荧光染色,Real,insulin,十二指肠,Pdx1,葡萄糖浓度,浓度依赖性,体外分化,实时定量聚合酶链反应
AB值：
0.187989
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