目的 在多囊卵巢综合征(PCOS)中探究巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达及其对卵巢颗粒细胞的自噬与胰岛素抵抗(IR)的影响.方法 收集40例PCOS患者(n=40)及20例对照女性(对照组,n=20)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,其中PCOS包含伴IR者(PCOS伴IR组,n=20)与不伴IR者(PCOS不伴IR组,n=20).采用ELISA法检测三组受试者卵泡液中MIF的表达,透射电子显微镜与Western blot法观察三组受试者颗粒细胞中的自噬空泡与自噬标志物微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)/微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)比值;体外培养人卵巢颗粒细胞系KNG,CCK-8法检测不同浓度MIF对颗粒细胞活性的影响;将KNG细胞分为4组:正常培养组(NC组)、MIF组、自噬抑制剂氯喹组(CQ组)和MIF+CQ组,Western blot法检测MIF对各组颗粒细胞中自噬相关蛋白LC3、自噬相关基因7(Atg7)、泛素结合蛋白(p62)及胰岛素信号通路中胰岛素受体底物-1(IRS-1)与葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达及蛋白激酶B(Akt)蛋白磷酸化的影响,葡萄糖摄取实验检测MIF对各组颗粒细胞摄取葡萄糖能力的变化.结果 与对照组或PCOS不伴IR组相比,PCOS伴IR组患者的卵泡液中MIF的表达水平及颗粒细胞的自噬水平增加(P<0.05,P<0.01);体外实验显示,MIF能够以浓度依赖性抑制颗粒细胞KNG的增殖活性;与NC组相比,MIF组与MIF+CQ组颗粒中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,Atg7蛋白表达增加(P<0.05),而p62蛋白、IRS-1蛋白、Akt蛋白磷酸化水平和GLUT4蛋白表达水平及葡萄糖摄取能力均降低(P<0.05),而与MIF组相比,MIF+CQ组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与Atg7蛋白表达水平均降低(P<0.05),而p62、IRS-1蛋白、Akt蛋白磷酸化水平和GLUT4蛋白表达水平及葡萄糖摄取能力均增加(P<0.05).结论 MIF可能通过上调颗粒细胞的自噬水平促进PCOS患者的IR发展,而抑制颗粒细胞的自噬则能改善MIF诱导IR.

多囊卵巢综合征;巨噬细胞迁移抑制因子;胰岛素抵抗;颗粒细胞

巩晓芸;韩锐;张于念;腊晓琳

新疆医科大学第一附属医院生殖医学中心,乌鲁木齐830054;省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室,乌鲁木齐 830054

安徽医科大学学报

[1]巩晓芸;韩锐;张于念;腊晓琳-.MIF通过诱导自噬促进卵巢颗粒细胞的胰岛素抵抗)[J].安徽医科大学学报,2022(10):1602-1608

KNG,MIF+CQ

胰岛素抵抗,多囊卵巢综合征,PCOS,巨噬细胞迁移抑制因子,卵泡液,透射电子显微镜,blot,空泡,微管,轻链,LC3,体外培养,人卵巢颗粒细胞,细胞系,CCK,细胞活性,NC,自噬抑制剂,氯喹,自噬相关蛋白,自噬相关基因,Atg7,泛素,结合蛋白,p62,胰岛素信号通路,胰岛素受体,底物,IRS,葡萄糖转运蛋白,GLUT4,蛋白激酶,Akt,蛋白磷酸化,葡萄糖摄取,实验检测,细胞摄取,体外实验,浓度依赖性,增殖活性,蛋白表达水平

0.168838