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典型文献
深海白色侧齿霉遗传转化体系建立及渗透压调控相关的EaSHO1基因功能
文献摘要:
海洋中具有丰富的动植物及微生物资源,海洋真菌是其重要组成之一.我们前期的研究发现一株深海真菌白色侧齿霉Engyodontium album能产生具有抑菌活性的次级代谢产物engyodontiuminA,该化合物能抑制黑曲霉、金黄色葡萄球菌及创伤弧菌等病原菌的生长,是一种潜在的海洋源抗菌药物.目前,该菌遗传转化体系尚未建立,不利于开展次级代谢产物合成调控机制及其他功能基因研究.本研究成功制备了深海白色侧齿霉菌的原生质体,建立了借助聚乙二醇3350介导的原生质体转化体系,并将pCT74-sGFP载体成功导入白色侧齿霉的原生质体中,结果显示外源GFP能稳定表达.此外,为了明确白色侧齿霉菌是否能够开展基因敲除研究,通过氨基酸序列同源比对,我们选取酵母高渗甘油信号途径中的同源基因EaSHO1进行初步探究.利用同源重组的方法成功将目的 基因EaSHO1的开放阅读框(ORF)替换成潮霉素磷酸转移酶基因(HPH),由此获得EaSHO1基因敲除突变体,并对突变体进行Southern杂交验证及初步的表型分析.结果 表明,EaSHO1缺失不影响白色侧齿霉菌的营养生长及对高盐胁迫的响应,亚细胞定位结果显示EaSho1-GFP主要定位于菌丝隔膜.综上所述,本研究成功构建了一株深海白色侧齿霉菌的遗传转化体系,并借此对其基因EaSHO1进行了初步生物学功能分析.
文献关键词:
白色侧齿霉菌;原生质体制备及转化;EaSho1蛋白;基因敲除;高盐胁迫
作者姓名:
余芝;陈晓峰;姚光山;陈建明;郑华伟;王宗华
作者机构:
闽江学院海洋研究院,福建福州350108;福建农林大学生命科学学院,福建福州350002
文献出处:
引用格式:
[1]余芝;陈晓峰;姚光山;陈建明;郑华伟;王宗华-.深海白色侧齿霉遗传转化体系建立及渗透压调控相关的EaSHO1基因功能)[J].菌物学报,2022(02):226-236
A类:
EaSHO1,Engyodontium,engyodontiuminA,白色侧齿霉菌,pCT74,sGFP,EaSho1,原生质体制备及转化
B类:
遗传转化体系,体系建立,渗透压,基因功能,洋中,动植物,微生物资源,海洋真菌,一株,深海真菌,album,抑菌活性,次级代谢产物,黑曲霉,金黄色葡萄球菌,创伤弧菌,抗菌药物,产物合成,合成调控,调控机制,功能基因,基因研究,聚乙二醇,稳定表达,基因敲除,氨基酸序列,同源比对,酵母,信号途径,同源基因,同源重组,开放阅读框,ORF,替换成,潮霉素,转移酶,酶基因,HPH,敲除突变体,Southern,交验,表型分析,营养生长,高盐胁迫,亚细胞定位,定位结果,菌丝,隔膜,综上所述,生物学功能分析
AB值:
0.282625
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