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miR-375-3p抑制DNA双链断裂的同源重组修复增强结直肠癌细胞放射敏感性的研究
文献摘要：
目的:探究miR-375-3p调控结直肠癌细胞放射敏感性的作用和机制。方法:在结直肠癌细胞HCT116及HT29中过表达miR-375-3p，利用CCK-8法检测细胞增殖能力，利用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，利用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡，利用流式细胞术检测细胞周期分布。过表达miR-375-3p后，检测γ-H2AX foci形成点数量、同源重组(HR)及非同源性末端连接(NHEJ)修复效率，分析miR-375-3p表达对DNA双链断裂(DSBs)以及其修复效率的影响；利用生物信息学预测miR-375-3p在HR修复通路中的下游靶基因，利用双荧光素酶报告基因法进一步验证miR-375-3p表达对靶基因重组蛋白A (RAD51)表达调控作用。最后，利用荧光定量PCR技术检测经
60Co γ射线2、6 Gy照射后HCT116细胞miR-375-3p的表达量；抑制miR-375-3p表达，经0、1、2、4、6 Gy不同剂量照射后，分析miR-375-3p表达变化对结直肠癌细胞HCT116放射敏感性的影响。
结果:过表达miR-375-3p显著抑制了结直肠癌细胞HCT116及HT29的增殖及克隆形成能力，诱发其细胞凋亡、G
1期周期阻滞和DSBs损伤，下调了Rad51表达，显著降低了HR修复效率[miR-375-3p(3.55 ± 0.30)%，miR-nc(1.97 ± 0.15)%；
t＝10.055，
P<0.05]；双荧光素酶报告基因实验显示miR-375-3p能够靶向Rad51 3′UTR区域结合(
t＝5.013，
P<0.05)；电离辐射能诱导miR-375-3p表达，抑制其表达显著降低了结直肠癌细胞放射敏感性(
t＝6.460、5.619、10.150，
P<0.05)。
结论:miR-375-3p能够靶向抑制Rad51表达，下调DSBs的HR修复效率，增强结直肠癌细胞的放射敏感性。
文献关键词：
结直肠癌;miR-375-3p;同源重组修复;RAD51;放射敏感性
中图分类号：
作者姓名：
李长泳;贾萌;王琪;彦林军;王治东;戚振华
作者机构：
军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 北京市放射生物学重点实验室，北京 100850;解放军总医院京西医疗区综合内科，北京 100144
文献出处：
引用格式：
[1]李长泳;贾萌;王琪;彦林军;王治东;戚振华-.miR-375-3p抑制DNA双链断裂的同源重组修复增强结直肠癌细胞放射敏感性的研究)[J].中华放射医学与防护杂志,2022(03):168-174
A类：
B类：
miR,3p,双链,链断裂,同源重组修复,结直肠癌细胞,放射敏感性,HCT116,HT29,过表达,CCK,细胞增殖能力,实验检测,细胞克隆形成,克隆形成能力,Annexin,FITC,流式细胞术,细胞周期,周期分布,H2AX,foci,非同,同源性,NHEJ,修复效率,DSBs,利用生物,复通,靶基因,报告基因法,对靶,基因重组,重组蛋白,RAD51,表达调控,60Co,Gy,不同剂量,表达变化,G
,周期阻滞,Rad51,nc,双荧光素酶报告基因实验,UTR,电离辐射,辐射能,靶向抑制
AB值：
0.247622
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