[目的]旨在为猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)灭活疫苗黏膜免疫筛选理想佐剂,降低疫苗副作用.利用小鼠模型评价不同佐剂制备的PDCoV灭活疫苗对体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答的影响.[方法]将甘露聚糖肽(PA)、CpG ODN2395、单磷酰脂质A(MPLA)佐剂分别与IMS 1313、GEL02佐剂联合制备PDCoV灭活疫苗,经鼻腔免疫BALB/c小鼠;将ISA201佐剂制备的PDCoV灭活疫苗经皮下免疫BALB/c小鼠,将PDCoV灭活抗原经鼻腔免疫BALB/c小鼠作为对照,间隔14d加强免疫一次.用ELISA方法检测小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的IgG、IgG1、IgG2a、IL-4、IFN-γ及粪便和BALF中sIgA表达水平;用MTT方法检测疫苗免疫后对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;观察并记录小鼠免疫后的临床表现,HE染色方法观察免疫小鼠主要器官组织的病理学变化,评价疫苗的安全性.[结果]ISA201组小鼠BALF和血清中的抗体(IgG、IgG1)及IL-4表达水平相对较高,但IgG2a、IFN-γ和粪便中sIgA表达水平较低;相较于 IMS 1313 组、IMS1313+2395 组、IMS1313+PA 组、IMS1313+MPLA 组,GEL02组、GEL02+2395 组、GEL02+PA 组、GEL02+MPLA 组小鼠 BALF 和血清中的抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、IL-4、IFN-γ及粪便中sIgA表达水平均较高;其中GEL02+2395组小鼠BALF和血清中IgG2a抗体、IFN-y及BALF和粪便中sIgA表达水平显著高于其他组;GEL02+2395疫苗、IMS1313+2395疫苗可促进T淋巴细胞增殖;小鼠主要器官组织未见明显病理变化,GEL02疫苗、GEL02+2395疫苗免疫小鼠的副反应最轻微.[结论]GEL02与CpG ODN2395佐剂联合制备PDCoV灭活疫苗经鼻腔免疫小鼠,不仅可增强小鼠体液免疫水平,也可有效提高细胞免疫和黏膜免疫水平,为黏膜疫苗的研发提供数据支持.

猪丁型冠状病毒;佐剂;黏膜免疫

李厚伟;张先锋;王彦辉;姬星宇;王蕾;张真真;李倩倩;张云飞;胡永浩

甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;河南普华基因科技有限公司,河南郑州450045;河南农业大学动物医学院,河南郑州450046

微生物学报

[1]李厚伟;张先锋;王彦辉;姬星宇;王蕾;张真真;李倩倩;张云飞;胡永浩-.不同黏膜佐剂对猪丁型冠状病毒诱导小鼠免疫应答的影响)[J].微生物学报,2022(07):2686-2701

免疫筛选,ODN2395,GEL02,ISA201,IMS1313+2395,IMS1313+PA,IMS1313+MPLA,GEL02+2395,GEL02+PA,GEL02+MPLA

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