目的 研究二氢卟吩e6(Ce6)、中性红(NR)以及虎红钠盐(RB)3种商品化光敏剂的光敏性质、光动力治疗(PDT)效果及诱导免疫原性细胞死亡(ICD)能力,筛选出最高效的ICD诱导剂用于抗肿瘤免疫治疗.方法 溶液实验:利用不同的活性氧(ROS)荧光探针评估溶液中3种光敏剂的光敏能力.细胞实验:探针检测肿瘤细胞内ROS生成能力;CCK-8细胞毒性试验比较3种光敏剂的细胞杀伤效果以及生物相容性;检测细胞表面暴露的钙网蛋白(ecto-CRT),高迁移率族蛋白1(HMGB1)以及培养基上清三磷酸腺苷(ATP)浓度评估3种药物的ICD诱导能力.动物实验:建立BALB/c小鼠4T1皮下肿瘤模型,10 d后分别在瘤内注射Ce6和NR(30μL,5 mg/mL),2 h后白光光照处理(10 min,400 mW/cm2),监测小鼠体质量及肿瘤组织体积变化.14 d后取材,通过流式细胞技术分析肿瘤组织中CD8+T细胞及脾脏组织CD8+T的IFN-γ因子分泌量;通过HE染色和TUNEL组织染色分析肿瘤组织中细胞凋亡情况.结果 在3种光敏剂中,Ce6的ROS产生能力最高,且显示出最强的肿瘤细胞杀伤效果;ecto-CRT、HMGB1荧光成像及胞外ATP含量显示Ce6相对于NR和RB具有更好的ICD诱导能力.动物实验显示,Ce6和NR组小鼠在光动力治疗后肿瘤体积显著变小,其中Ce6肿瘤治疗效果明显好于NR及PBS组.流式结果显示Ce6与NR组瘤内CD8+T细胞占比分别为12.7％和6.1％,脾脏组织IFN-γ+CD8+T细胞占比分别为7.1％和2.8％,两组之间差异有统计学意义(P<0.05).HE染色和TUNEL染色显示相对于PBS组,两个治疗组肿瘤组织有明显核凋亡情况,且Ce6的治疗效果明显强于NR.结论 3种光敏剂中Ce6的ROS生成效率最高,光动力效果最好,诱导ICD能力最强,并且在肿瘤治疗中能明显提升CD8+T细胞的数量及功能,能相对高效的启动适应性免疫应答,抑制肿瘤生长.

二氢卟吩e6;中性红;虎红钠盐;光动力治疗;免疫原性细胞死亡;抗肿瘤免疫治疗

内蒙古医科大学,内蒙古 呼和浩特 010110;中山大学附属第一医院精准医学研究院,广东 广州 510080;内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古 呼和浩特 010017

[1]林萱;毛铎;白瑞霞-.三种商品化光敏剂诱导小鼠免疫原性细胞死亡的效果比较)[J].南方医科大学学报,2022(12):1791-1798

虎红钠盐

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