目的 探讨干扰CTPS基因对川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡的影响.方法 通过生物信息学分析CTPS基因在人胃癌组织中的表达情况以及CTPS基因高表达的胃癌患者的总生存期.以人胃癌MKN-45细胞为实验材料,构建CTPS基因干扰载体,转染MKN-45细胞48 h后,采用qRT-PCR和Western blot检测CTPS基因mRNA和蛋白表达情况.用80 nmol/L的川楝素处理干扰CTPS基因的MKN-45细胞48 h,使用MTT实验法检测细胞存活率,激光共聚焦显微镜观察细胞形态,免疫荧光法检测γH2AX的表达.结果 生物信息学分析发现CTPS在人胃癌组织中高表达,CTPS基因高表达的胃癌患者总生存期短.向MKN-45细胞中分别转染Sh-ctrl空载体和Sh-CTPS干扰载体,qRT-PCR和Western blot检测显示,与转染Sh-ctrl空载体相比,转染Sh-CTPS干扰载体的MKN-45细胞中CTPS mRNA和蛋白表达均降低,其中转染ShCTPS-3干扰效果最显著,分别降低了85.21％和53％(P<0.001).检测细胞存活率及形态变化显示,与Sh-ctrl组相比,ShCTPS-3组细胞存活率降低(P<0.01),细胞皱缩,形态不规则,呈现凋亡特征,细胞凋亡率升高(P<0.05);在此基础上用80 nmol/L的川楝素处理转染Sh-ctrl和ShCTPS-3的MKN-45细胞48 h,与Sh-ctrl+川楝素组相比,ShCTPS-3+川楝素组细胞存活率降低(P<0.001),细胞出现凋亡小体,细胞凋亡率升高(P<0.05).结论 干扰CTPS基因促进川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡.

CTPS基因;川楝素;胃癌;MKN-45细胞

罗海静;潘阳;陈雯;张伟伟;邵淑丽;杨清竹;李铁

齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江 齐齐哈尔 161006;抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室,黑龙江 齐齐哈尔 161006

南方医科大学学报

[1]罗海静;潘阳;陈雯;张伟伟;邵淑丽;杨清竹;李铁-.干扰CTPS基因促进川楝素诱导的人胃癌MKN-45细胞凋亡)[J].南方医科大学学报,2022(08):1126-1133

CTPS,ShCTPS,ctrl+

川楝素,MKN,生物信息学分析,胃癌组织,胃癌患者,总生存期,实验材料,基因干扰,干扰载体,转染,qRT,blot,nmol,素处理,MTT,实验法,细胞存活率,激光共聚焦显微镜,细胞形态,免疫荧光法,H2AX,空载,干扰效果,形态变化,皱缩,细胞凋亡率,3+,凋亡小体

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