目的:基于Beclin-1、Bcl-2、Caspase-3对自噬和凋亡的调控,观察针刀对膝关节骨关节炎(KOA)兔膝关节软骨的保护作用,探讨针刀治疗KOA的可能机制.方法:雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组和针刀组,每组8只.采用改良Videman法将兔左后肢以伸直位石膏固定6周建立KOA模型.针刀组选取左侧"鹤顶次""髌内下""髌外下""成腓间""委阳次""阴陵次"行针刀治疗,每7d干预1次,共4次.干预结束1周后,采用Lequesne膝关节级别评分法评估兔左膝关节疼痛、肿胀程度和功能;HE染色法观察各组兔膝关节软骨病理形态,TUNEL染色法检测膝关节软骨细胞凋亡率;透射电镜法观察膝关节软骨细胞自噬溶酶体;Real-time PCR法和Western blot法检测膝关节软骨组织中自噬和凋亡调控分子Beclin-1、Bcl-2、Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组兔左膝关节Lequesne评分、软骨细胞凋亡率、膝关节软骨组织中Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.001),软骨细胞胞质内自噬溶酶体减少(P<0.001),软骨组织中Beclin-1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.001).与模型组比较,针刀组兔左膝关节Lequesne评分、软骨细胞凋亡率、膝关节软骨组织中Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.001),软骨细胞胞质内自噬溶酶体增多(P<0.001),软骨组织中Beclin-1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.001).空白组膝关节软骨表面光滑,软骨细胞均匀呈柱状排列;模型组膝关节软骨表面破损严重,出现大量剥脱缺损,表层软骨细胞稀少,细胞排列紊乱;针刀组膝关节软骨表面较光滑,表层细胞稍减少,软骨细胞排列趋于空白组.结论:针刀治疗能通过调控Beclin-1、Bcl-2、Caspase-3等蛋白表达而上调KOA兔膝关节软骨细胞自噬水平,减少其软骨细胞凋亡,进而发挥保护软骨和改善关节疼痛及功能障碍的作用,这可能是针刀治疗KOA的作用机制之一.

膝关节骨关节炎;针刀;自噬;凋亡

刘晶;曾维铨;林巧璇;卢莉铭;郭泽兴;刘洪;张良志;修忠标

福建中医药大学附属人民医院骨伤二科,福州350004;福建中医药大学附属康复医院疼痛康复科,福州350003;福建中医药大学附属第三人民医院骨伤一科,福州350122;福建中医药大学中医学院,福州350122;福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室,福州350122

针刺研究

[1]刘晶;曾维铨;林巧璇;卢莉铭;郭泽兴;刘洪;张良志;修忠标-.基于自噬及凋亡调控探讨针刀对膝关节骨关节炎兔软骨的保护作用)[J].针刺研究,2022(12):1080-1087

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