典型文献
miR-34a通过靶向ATG7调节结直肠癌细胞自噬与增殖
文献摘要：
目的 探讨miR-34a对结直肠癌细胞自噬和增殖的调控机制.方法 采用实时定量反转录PCR检测2019年5月至2020年5月期间中国医科大学附属第四医院结直肠癌手术切除的30例结直肠癌组织以及相应癌旁组织中miR-34a的表达水平,同时检测结直肠癌细胞(RKO、LoVo、SW480和SW620)和人正常结肠上皮细胞(FHC)中miR-34a的表达水平.通过pcDNA3.1-miR-34a转染结直肠癌细胞株SW480以过表达miR-34a.CCK-8法检测细胞活性.Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubular associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬相关基因7(autophagy associated gene 7,ATG7)的表达.免疫荧光检测LC3荧光斑点表达.Starbase数据库分析miR-34a与ATG7的相关性,并采用荧光素酶报告基因实验验证miR-34a与ATG7的结合情况.SW480细胞共转染pcDNA3.1-miR-34a和pcDNA3.1-ATG7后,CCK-8法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞增殖水平.结果 miR-34a在结直肠癌组织的表达低于相应癌旁组织,在结直肠癌细胞(RKO、LoVo、SW480和SW620)中的表达低于FHC细胞(均P<0.05).过表达miR-34a 72 h后SW480细胞活性降低(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.01),免疫荧光显示LC3荧光斑点减少(P<0.01).过表达miR-34a 24 h后SW480细胞ATG7 mRNA表达降低(P<0.01).Starbase分析结果表明,miR-34a可以靶向结合ATG7.荧光素酶报告基因实验显示,miR-34a抑制野生型ATG7-3'UTR质粒转染的荧光素酶活性(P<0.01),而对突变型ATG7-3'UTR质粒转染的荧光素酶活性无影响(P>0.05).共转染pcDNA3.1-miR-34a和pcDNA3.1-ATG772 h后,SW480细胞活性相对增加(P<0.01),细胞增殖能力增强(P<0.01).结论 miR-34a通过靶向ATG7抑制结直肠癌细胞自噬和增殖.
文献关键词：
结直肠癌;miR-34a;自噬;增殖;自噬相关基因7
中图分类号：
作者姓名：
文彩艳;李晓霞
作者机构：
中国医科大学附属第四医院普外科,辽宁 沈阳 110032
文献出处：
引用格式：
[1]文彩艳;李晓霞-.miR-34a通过靶向ATG7调节结直肠癌细胞自噬与增殖)[J].实用肿瘤杂志,2022(04):299-306
A类：
microtubular,ATG772
B类：
miR,34a,节结,结直肠癌细胞,细胞自噬,调控机制,实时定量,中国医科大学,结直肠癌手术,手术切除,结直肠癌组织,癌旁组织,同时检测,RKO,LoVo,SW480,SW620,结肠上皮细胞,FHC,pcDNA3,细胞株,过表达,CCK,细胞活性,blot,自噬相关蛋白,微管,轻链,associated,protein,light,chain,LC3,自噬相关基因,autophagy,gene,免疫荧光检测,光斑点,Starbase,数据库分析,荧光素酶报告基因实验,共转染,克隆形成,实验检测,野生型,UTR,质粒转染,荧光素酶活性,突变型,活性相,细胞增殖能力
AB值：
0.198034
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